Amplisense hcv fl

Tünetek

A tavak, a parkok és a négyzetek, az aktív agyagok hőszezeihez. Tom, perebuivaychi on naturі, varto pourbuvatisya a vlasnu bezpeku, abi.

2017/03/01

teszt AmniSure

Vegyél egy tesztet a szivárgás amniotikus folyadék terhes Amnishur akkor is a gyógyszertárak Kijevben:
1. "Arnika" gyógyszertárak.

2016/08/26

FLOROTSENOZ

Egy új generáció komplex vizsgálata az Urogenitalus traktus klinikailag jelentős fertőzéseinek diagnózisára a szaporodási korú nők esetében..

UTASÍTÁSOK. "AmpliSens HCV genotípus-FL" AmpliSens

másolat

1 utasítást a kit reagensek kimutatására és differenciálódását genotípusok a hepatitis C (HCV) klinikai mintákban polimeráz láncreakcióval (PCR) a hibridizációs-fluoreszcens detektálás „valós időben” üzemmód „AmpliSens HCV-genotípus-FL» AmpliSens Szövetségi költségvetési intézmény tudomány „Központi Kutató Intézet epidemiológia”, Oroszország, Moszkva, utcai Novogireevskaya 3a ház

2 TARTALOM A HAGYOMÁNYOK JEGYZÉKE. 3 CÉL. 3 A MÓDSZER ELVE. 3 FORMÁTUMOK ÉS A REAGENSEK KIBOCSÁTÁSI FORMAI. 5 ANALITIKAI JELLEMZŐK. 5 ÓVINTÉZKEDÉSEK. 6 KIEGÉSZÍTŐ ANYAGOK ÉS BERENDEZÉSEK. 7 LEGYEN, szállítás és tárolás a vizsgálati anyag. 9 ÖSSZETÉTEL ASPECT FRT PCR-RNS kivonása tanulmányok Specimen ARRANGEMENT reverz transzkripciós reakció előállítása A. csövek a reverz transzkripcióhoz B. végrehajtása A reverz transzkripciós reakciót amplifikáció, detektálás „valós időben” A. előállítás csövek A1 amplifikáció. Előállítása kémcsöveket amplifikációval a sor „PCR kit” reagensek variáns FRT-G A2. Előállítása a kémcsövek amplifikálására használatával kit reagensek „PCR készlet” változat FRT-G B. levezetése amplifikációs kimutatási „valós időben” Elemzés és az eredmények értelmezése ELTARTHATÓSÁG, szállítás és tárolási körülmények FÜGGELÉK 1. KITERMELÉSE alkalmazásával RNS-A reagens-készlet " ribo-Sorb "MELLÉKLET 2. RNS kivonása a REAGENSKÉSZLETTEL" ribo-prep „ALKALMAZOTT SZIMBÓLUMOK nyomtatott termék x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 2 32

3 Rövidítések A következő rövidítéseket és szimbólumokat használjuk ezeket az utasításokat: DNS dezoksirubonukleinovaya sav cDNS komplementer DNS RNS ribonukleinsav reverz transzkripciójával EKO belső kontroll minta OKO negatív kontroll PKO pozitív kontroll K + - pozitív kontroll PCR K - negatív kontroll PCR OK - negatív PCR extrakciós ellenőrzése polimeráz láncreakció FBUN Központi Kutató Intézet Epidemiológiai HCV FRT CÉL szövetségi megállapított költségvetési ix Science „Központi Kutató Intézet Epidemiológiai” A Szövetségi Felügyelettől a fogyasztói jogok védelme és az emberi jólét, a hepatitis C vírus fluoreszcens detektálás „valós időben” reagensek „AmpliSens a HCV-genotípus-FL” kifejezés kimutatására és differenciálódását vírus genotípusok hepatitis C (HCV) klinikai mintákban polimeráz láncreakcióval (PCR) a hibridizációs-fluoreszcens detektálás „valós időben.” Meghatározása HCV genotípusok 1a, 1b, 2, 3a, 4 keresztül végezzük, "PCR készlet" változat FRT-G1-4; meghatározzuk genotípusok HCV 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5a, 6 keresztül végezzük, "PCR készlet" változat FRT-g1-6. Ez a reagens készlet használata ajánlott észlelése után a HCV-RNS a mintákat a készletek célja, mind kvalitatív és kvantitatív meghatározására a HCV RNS-t (például, „AmpliSens HCV-FL» segítségével gibridizatsionnofluorestsentnuyu felderítése, vagy „AmpliSens HCV- ERH „alkalmazásával elektroforetikus kimutatása amplifikációs termékek (gyártó FBUN Epidemiológiai CRI)). FIGYELEM! PCR elemzés eredményeit rögzítik a komplex betegség diagnózisa 1. ELVE 1. módszer Az uniós irányelv 98/79 / EC. 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 3 32

4 alapja az az elv, vizsgálatára RNS extrakciós vérplazma együtt rekombináns belső kontroll minta (ASD), végző RNS reverz transzkripciós reakció és PCR A cDNS amplifikálásával gibridizatsionnofluorestsentnoy detektálás „valós időben”. Annak érdekében, hogy kizárja a téves negatív eredmények a tanulmány belépett EKR, amely lehetővé teszi, hogy ellenőrizzék minden fázisában elemzés és hatásának értékelése PCR inhibitorok a tanulmány eredményeit. Genotípusának meghatározása HCV egységes minta tartott több csövek, minden egyes cső a két differenciált HCV genotípus, vagy az egyik genotípus és a HCV EKO. A készletet két vagy több csatorna fluoreszcens detektálására szolgáló készülékekre tervezték. A táblázat azokat a csatornákat sorolja fel, amelyeken keresztül HCV genotípusokat mutatnak ki minden egyes reakcióelegyhez. A reakcióelegyet 1b / 3a 1a / 2 EKR / 4 5a / 6 genotípusok 2 csatorna kimutatható HCV FAM / zöld 1b 1a ASD 5a JOE / HEX / Sárga / Cy3 3a része "PCR kit" variáns FRT-g1-6. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 32. oldal 4

5 formátumban ÉS KIPUFOGÓGÁZ reagens-készlet reagenskészlet gyártott egy formátum: A formátum FRT reagenskészlet gyártott 7 formák beállítva: Form 1 magában foglalja a reagenskészletek „ribo-Sorb” variáns 50 „Reverte-L» opció 50, »PCR kit« opció FRT-g1-4. 2 forma magában foglalja a reagenskészletek "ribo-prep" variáns 50 „Reverte-L» opció 50, "PCR kit" variáns FRT-G1-4. A 3. formanyomtatvány tartalmaz egy FRT-g1-4 reagens "PCR kit" opciót. Forma 4 magában Reagensek "ribo-Sorb" variáns 50 „Reverte-L» opció 50, "PCR kit" variáns FRT-g1-6. 5. formája magában foglalja a készletek a reagensek "ribo-prep" variáns 50 „Reverte-L» opció 50, "PCR kit" variáns FRT-g1-6. A 6. számú forma tartalmaz egy reagenskészletet az "FRT-g1-6" PCR kit opcióhoz. Forma 7 magában reagenskészletek ömlesztve, csomagolt egyes reagensek, jelzett reagenseket azok nagykereskedelmi csomagoláson. Alak konfiguráció 1, 2, 3 célja, hogy meghatározza genotípusok 1a, 1b, 2, 3a, 4 ° C-formái HBV szerelvény 4, 5, 6 úgy vannak kialakítva, hogy meghatározza genotípusok 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5a, 6 HCV C. képez szerelvény 1, 2, 4, 5 vannak kialakítva, hogy átfogóan PTsRissledovaniya beleértve az extrakciós RNS klinikai anyagból, lebonyolítása reverz transzkripciójával RNS és cDNS PCR-amplifikálását gibridizatsionnofluorestsentnoy detektálás „valós időben”. Alkossanak meg a 3 és 6 alkalmazunk a PCR-amplifikáció cDNS hibridizációs-fluoreszcens detektálás „valós időben.” Elvégzéséhez a teljes elemzést használata szükséges reagenskészletek FBUN Kutató Intézet Epidemiology az RNS kivonása (reagenskészletek „ribo-Sorb” vagy „ribo-prep”), és a reverz transzkripciós reakció (kit reagens „Reverte-L»). A 7 formanyomtatványt gyártási célokra terveztük az ügyfél nyelvének utólagos megjelöléséhez és készletkészítéshez. FIGYELEM! Használata 7 formák teljes készlete csak szabályokkal összhangban jóváhagyott FBUN Központi Kutató Intézet Epidemiológiai. ANALITIKAI HARAKTISTIKI 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 5 32

6. Analitikai érzékenység extrakciós térfogat, l kit RNS-t vonunk / DNS 100 "ribo-Sorb" 100 "ribo-prep" készlet amplifikálására és kimutatására "PCR kit" variáns FRT-G1-4, «PCR kit” kiviteli alak FRT- g1-6 «PCR kit” variáns FRT-G1-4, «PCR kit” variáns FRT-g1-6 analitikai érzékenysége, IU / ml 5x10 3 2,5x10 3 analitikus specifikusság Assessment analitikai reagens készlettel specificitása nem mutatott közötti keresztreakció genotípusok 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5a és 6. hepatitis C vírus segítségével erősen rekombináció kovariáns pozitív kontroll minták és a vérplazma mintákat megfelelő HCV genotípusok. ÓVINTÉZKEDÉSEK munkát kell elvégezni a laboratóriumban végző molekulyarnobiologicheskie (PCR) Klinikai minták jelenlétében fertőző ágensek, megfelelően egészségügyi-járványügyi szabályok SP „biztonsági munka mikroorganizmusokkal III IV patogenitási csoportok (veszély) és aktivátorok a parazitás megbetegedés”, SanPin „Egészségügyi járványügyi kezelésének követelményeit orvosi hulladékot „és az iránymutatások az MU” Szervezet laboratóriumok módszerekkel amplifikációs n kleinovyh savak ha dolgozik anyagot tartalmazó mikroorganizmusok patogenitási csoportokat I IV”. Működés közben mindig eleget tesznek a következő követelményeknek: - úgy kell tekinteni, mint a vizsgálati mintákat a fertőző és veszélyes munkát szervezni és tárolás összhangban SP „biztonsági munka mikroorganizmusokkal III IV patogenitási csoportok (veszély) és parazitás betegségek szerek.” - tisztítható és fertőtleníthető palackozott minták és reagensek alkalmazásával fertőtlenítőszerek összhangban SP „biztonsági munka mikroorganizmusokkal III IV patogenitási csoportok (veszély) és parazitás betegségek szerek.” - A laboratóriumi eljárásnak egyirányúnak kell lennie. Az elemzés a 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 6 32

7 különálló szoba (zónában). A munkát meg kell kezdeni Zone Spin-Zone továbbra erősítés és felderítése. Nem térnek vissza a mintákat, felszerelések és anyagok a zónában, amelyben az eljárást végeztünk előző lépésben. - Vegye fel nem használt reagenseket összhangban SanPiN „Egészségügyi követelmények az orvosi hulladék.” FIGYELEM! Amikor eltávolítja a hulladékot erősítés után (csövek tartalmazó PCR-termékek) elfogadhatatlannak megnyitása a csövek és fröccsenő a tartalmát, mivel ez ahhoz vezethet, hogy szennyeződés a PCR-termékek laboratóriumi területen, eszközök és reagensek. Használja a készletet szigorúan az erre a célra szánt célra. Engedélyezze csak a felhatalmazott személyzet számára a kit használatát. Ne használja a készletet a lejárati idő után. Egyszer használatos kesztyű, laboratóriumi köpeny, szemvédő, miközben dolgozik a minták és reagensek. A munka befejezése után alaposan meg kell mosni a kezet. Kerülje a bőrrel, szemmel és nyálkahártyákkal való érintkezést. Érintkezés esetén vízzel azonnal le kell mosni és orvoshoz kell fordulni. A biztonsági adatlapok (MSDS biztonsági adatlapok) kérésre rendelkezésre állnak. KIEGÉSZÍTŐ ANYAGOK ÉS BERENDEZÉSEK TERÜLET 1. extrakciója RNS klinikai anyagból 1. A készlet reagensek RNS / DNS „ribo-Sorb” (N) „ribo prep” (TU), vagy más ajánlott FBUN CRI Epidemiology, ha dolgozik teljes formák 3, Lamináris doboz. 3. Vortex. 4. mikrocent típusú „Eppendorf” ezer 12 g. 5. Termosztát a csövek, mint a „Eppendorf” 25-100 C. 6. Adagolóautomaták változtatható térfogatú (5-50 ul, 20 ul 200 és 100-1000 l). 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / pp. 7, 32

7. Eldobható polipropilén csavaros vagy szorosan lezárt 1,5 ml-es csövek. 8. Eldobható tippek 100 μl-ig terjedő szűrővel, legfeljebb 200 μl-ig és 1000 μl-ig állványoknál. 9. Vákuumos orvosi szívóeszköz csapdákkal a felülúszó eltávolítására. 10. Eldobható tippek 200 μl-ig állványon. 11. Állványok 1,5 ml térfogatú csövekhez. 12. Hűtőszekrény 2-8 ° C-ig. 13. Különálló köntös, sapka, cipő és eldobható kesztyű a MU szerint. Kapacitás fertőtlenítő oldattal. TERÜLET 2. elvégzése a reverz transzkripciós reakció és amplifikációs „valós időben” 1 A reagensek elvégzéséhez reverz transzkripciós reakció „Reverte-L» (W) működés közben formák teljes 3, ökölvívó abacterial levegő környezetben (PCR-box). Centrifuga / vortex. 4. Automatikusan változó térfogatú adagolók (5-50 μl és 20-200 μl). 5. Eldobható tippek 100 μl-es és legfeljebb 200 μl-es szűrővel állványoknál. 6. Állványok 0,5 ml vagy 0,2 ml vagy 0,1 ml-es csövekhez (a használt cső típusának megfelelően). 7. Hűtőszekrény 2-8 C fagyasztó legfeljebb mínusz 16 ° C 8. Külön palást, sapka, cipő, egyszer használatos kesztyű MU kapacitás visszaállítása terminálok. Végrehajtása során reverz transzkripciós reakció segítségével a „Reverte-L»: 10. Eldobható polipropilén csövekbe 0,2 ml vagy 0,5 ml (attól függően, hogy a felhasznált modell thermocycler, vagy a termosztát, amelyben a reverz transzkripciós reakciót). 11. Termosztát a csövek, mint a "Eppendorf" 25-100 ° C, vagy egy programozható thermal cycler (például, "Tertsik" ( "DNS-technológia", Oroszország), Gradient Palm Cycler (Corbett Research, Ausztrália), GeneAmp PCR System 2700 (Applied Biosystems USA). 12. A beállítás a reverz transzkripciós reakció kevesebb, mint 10 2 vizsgálat (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 8 32

9 minta automatikus változó térfogatú adagoló (0,5-10 μl). 13. A beállítás a reverz transzkripciós reakció kevesebb, mint 10 vizsgálati minták eldobható tippeket szűrővel 10 ul állványt. Amikor dolgozik "PCR készlet": 14. A programozható thermocycler rotációs típusú (például, Rotor-Gene 3000 vagy 6000 (Corbett Research, Ausztrália), Rotor-Gene Q (Qiagen, Németország)), vagy a tabletta-típusú thermal cycler (például jcycier iq5 (Bio-Rad, USA)), vagy amplifikálható SmartCycler II (Cepheid, USA), vagy Mx3000P, Mx3005P (Stratagene, USA) és az ajánlott FBUN Kutatóintézet Járványtani iránymutatások a használja ezt a reagens kit). 15. Eldobható polipropilén csövek PCR: a) a vékony falú PCR-csövekbe 0,2 ml-domború sapkával (nestripovannye vagy stripovannye) egy tabletta-típusú készülék; b) vékony falú PCR-csövekbe 0,2 ml-egy lapos fedéllel (nestripovannye) vagy stripovannye csövek 0,1 ml térfogatban egy rotációs típusú eszköz. c) PCR-csövekbe térfogata 0,025 ml (Cepheid, USA) készülék segítségével SmartCycler II (Cepheid, USA). 16. Jelzett állvány (síkágyas típusú eszközök használata esetén). 17. Eldobható polipropilén csövek PCR (lapos sapka, nestripovannye) 0,5 ml 18. Centrifugáljuk, és állni csövek (Cepheid, USA) SmartCycler II (Cepheid, USA). Minta gyűjtése, szállítása és tárolása a vizsgált anyag megkezdése előtt a munka meg kell ismernie az iránymutatásai „veszi, szállítás, tárolás klinikai anyag PTsRdiagnostiki„által kidolgozott FSIS CRIE Rospotrebnadzor, Moszkva, 2008 A PCR vizsgálatok során perifériás vérplazma. A vérplazma összegyűjtjük egy kémcsőbe egy 3% -os oldatához EDTA-t arány 20: 1 (20 rész vér: 1 rész EDTA). Egy zárt tesztcsövet vérrel többször fordítanak. A vérvétel időpontjától számított 6 órán belül a plazmát be kell vinni és át kell vinni egy új csőbe. Erre a célra egy kémcsőbe vért centrifugáljuk 20 percen át g, majd a plazmát összegyűjtöttük, és átvittük elválasztásához eldobható 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 9. 32

10 tesztcső. A plazmát legfeljebb 3 napig tárolhatjuk 2-8 ° C hőmérsékleten és hosszú ideig, legfeljebb 68 ° C hőmérsékleten. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 10. oldal, 32

11 Format FRT FORMAT FRT ÖSSZETÉTEL reagenskészlet „ribo-Sorb” opciót 50 reagenskészlet RNS / DNS-extrakció klinikai anyagból tartalmazza: A reagens leírása Térfogat, ml Max Lízis Oldat mosására egy megoldást mosására 3 oldat mosásához 5 1 injekciós üveg 50 1 injekciós január 20 injekciós üveg szorbens szuszpenzió fehér tampont 1,25 1 RNS 0,5 pufferben csövek 5 reagenskészlet tervezték izolálása RNS / DNS a 50 minta, beleértve kontrollok. Tartalmazza az öntőforma összeállítás 1. és 4. Reagens kit „ribo-prep” opciót 50 reagenskészlet RNS / DNS-extrakció klinikai anyagból tartalmazza: A reagens leírása Térfogat, ml Max lízisoldatot kicsapjuk az oldatot, hogy mossa az oldatot 3 RNS-mosópufferrel 4 átlátszó kék injekciós üveg 20 január 25 január 1 injekciós üveg 10 1.2 4 injekciós reagenskészlet tervezték izolálása RNS / DNS a 50 minta, beleértve kontrollok. Tartalmazza a forma szerszám a 2. és 5. Reagens készlet „Reverte-L» 50 megvalósítási módja szerint a reagenskészlet tárolva 3 lízisoldattal, lízis-oldatot és tisztítására 1 hőmérsékleten 2-8 C lehet mint kristályok kiválnak. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 11. oldal 32

12 formátumú FRT cDNS a RNS templát tartalmazza: RT-G-mix-1 reverz transzkriptáz RT-mix (MMLV) DNS puffer reagens Leírás Térfogat, ml Max 0,01 0,125 5 cső 5 0,03 csövek 1 kémcsőbe 1, 2 1 tesztcső Az 50 reagenskészlet 50 fordított transzkripciós reakcióra van tervezve, beleértve a kontrollokat. Reagens készletet "PCR kit" variáns FRT-G1-4 Reagenskészlet vett cDNS PCR genotípusok (1a, 1b, 2, 3a, 4) HCV gibridizatsionnofluorestsentnoy detektálás "valós időben" kifejezés magában foglalja: PCR-keverék-1- FRT HCV genotípusok 1b / 3a PCR-keverék-1-FRT HCV genotípusok 1a / 2 PCR mix-1-FRT HCV EKR / 4-es genotípus reagens Leírás térfogata, ml száma RT-PCR-keverék-2-FEP / FRT-polimeráz (TaqF) FFP cDNS HCV genotípusok 1b / 3a FFP cDNS HCV genotípusok 1a / 2 FFP HCV cDNS EKR / 4 genotípusú TE-pufferban cső 0,6 1 0,6 0,6 1 1 cső cső cső 3 0,3 0,03 3 cső 0,2 1 cső 0,2 1 cső 0,2 1 cső 0,5 1 cső K A reagenskészlet 55 teszthez (165 amplifikációs reakció) van tervezve, beleértve a kontrollokat. Az egységbe beépített képez 1, 2 és 3. A készlet reagensek csatolt extrakciós szakaszban kontrollmintákat :. 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 12 32

13 FORMAT FRT Leírás reagenstérfogat, ml Max OKO EKR STI-248-rec 0,5 0,5 1 1 cső cső reagenskészlet "PCR kit" variáns FRT-g1-6 Reagenskészlet vett cDNS PCR genotípusok ( 1a, 1b, 2, 3a, 4, 5a, 6) HCV gibridizatsionnofluorestsentnoy detektálás "valós időben" kifejezés magában foglalja: reagens Leírás térfogata, ml Max PCR mix-1-FRT HCV genotípusok 1b / 3a PCR smes- 1-FRT HCV genotípusok 1a / 2 PCR-keverék-1-FRT HCV EKR / genotípusok 4 PCR mix-1-FRT HCV genotípusok 5a / 6 RT-PCR-keverék-2-FEP / FRT-polimeráz (TaqF) FFP cDNS HCV genotípusok 1b / 3a FFP cDNS HCV genotípusok 1a / 2 FFP HCV cDNS EKR / 4 genotípusú FFP KDN HCV genotípusok 5a / 6 TE pufferben cső 0,6 0,6 1 0,6 1 1 cső cső 1 cső 0,6 0,3 0,03 4 4 csövek kémcsövek 1 tesztcső 0,2 0,2 ​​0 1 cső, február 1 injekciós üveg 0,2 0,5 1 1 cső cső reagenskészlet tervezték tartja 55 teszt (220 amplifikációs reakciót), beleértve a kontrollok. Az egységbe beépített képez 4., 5. és 6. A készlet reagensek csatolt ellenőrző minták extrakciós lépésben: 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 13 32.

14 FORMAT FRT Leírás reagenstérfogat, ml Max OKO EKR STI-248-rec 0,5 0,5 1 1 cső cső PCR RESEARCH ARRANGEMENT PCR vizsgálatban az alábbi lépésekből áll: extrakció RNS klinikai mintákból. A fordított transzkripciós reakció végrehajtása. Hibridizáció-fluoreszcens kimutatással történő "amplifikáció" végrehajtása valós időben. Az eredmények elemzése és értelmezése. Az eljárás részleteit a elemzés típusa alapján a használt berendezések kerül bemutatásra „Útmutató a használata egy reagenskészlet meghatározására és megkülönböztetésére virális genotípusok a hepatitis C (HCV) klinikai mintákban polimeráz láncreakcióval (PCR) a hibridizációs-fluoreszcens detektálás” AmpliSens HCV-genotípus-FL »» által kifejlesztett, a Központi Kutató Intézet Epidemiológiai FBUN. FIGYELMEZTETÉSI MINTÁK RÉGI KIVITELEZÉSE! Amikor dolgozik RNS csak akkor kell használni, eldobható műanyag fogyóeszközök egy speciális jelölés «RNasefree», «DN-áz mentes». RNS extrakció reagenskészletek használt ajánlott FBUN CRI Epidemiology: kitet használva „ribo-Sorb” reagensek működési eljárás, lásd az 1. mellékletben „Extraction alkalmazásával RNS-reagenskészlet” ribo-sorb.”. használatával kit reagensek „ribo-prep” eljárással működik cm. 2. függelékében „Extraction alkalmazásával RNS-reagenskészlet” ribo-prep”. FIGYELEM! A kapott RNS-készítmény nem tárolható, a fordított reakció 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / p. 14 32

15 FORMÁT Az FRT transzkripciót azonnal RNS-minta megszerzése után kell elvégezni. REAKCIÓ REAKCIÓ KEZELÉSE A reakcióelegy teljes térfogata 20 μl, beleértve az RNS minta térfogatát 10 μl. FIGYELEM! Az RNS-sel végzett munka során csak olyan eldobható műanyag fogyóeszközöket kell használni, amelyek "RNasefree", "DNase-free" feliratúak. A. Kémcsövek előállítása a reverz transzkripcióhoz A reagensek és az RNS minták csövekbe való behelyezéséhez eldobható tippeket alkalmaznak szűrőkkel. FIGYELEM! A reakcióelegy komponenseit közvetlenül a reverz transzkripciós reakció előtt kell összekeverni. 1. Mielőtt a munka megindulna, alaposan keverje össze a vortex RT-mixet és az RT-G-mix-1-et. Csavarja ki a cseppeket a kémcsövekből. 2. Vegye ki a szükséges számú csövek térfogata 0,2 ml vagy 0,5 (attól függően, hogy a felhasznált modell thermocycler, vagy a termosztát) végezzen reverz transzkripciós reakció, száma szerint a vizsgálati és kontroll minták (egy kontroll extrakciós (OK)). Jelölje ki a tesztcsöveket. 3. A minták reverz transzkripciója során: a) A reakcióelegyet 12 reakcióval állítjuk elő. Erre a célra cső RT-mix hozzá 5 ul RT-G-mix-1, alaposan összekeverünk örvénykeveréssel és üledék esik a cső kupakját. b) Adjunk hozzá 6 μl revertázt (MMlv) a kapott oldathoz, pipettázzunk ötször, vortexel keverjük össze. A csepp kupakját rövid centrifugálással elöntjük. 4. végrehajtása során reverz transzkripciójával kevesebb, mint 10 minta: A készítmény a reakcióelegy kell keverni egy külön csőben alapuló reagensek 1 reakció a következő: 10 liter RT-mix, 0,4 liter RT-G-mix-1 és 0, 5 μl revertáz (MMlv) (lásd még az 1. táblázatot). Az RT-G-mix-1 és a revertáz (MMlv) bevezetése során az egyes reagenseket legalább 5-szer pipettázzuk. Alaposan keverjük össze a keveréket a vortexen és kicsapjuk a cseppeket a cső kupakjából. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 32/32

16 FRT FORMÁTUM VIGYÁZAT! A visszaállítás (MMlv) hőérzékeny! Ne hagyja szobahőmérsékleten sokáig! A használat után azonnal tisztítsa meg a hűtőszekrényt a fagyasztóban! A kötet a reagens egy (I) reakció száma klinikai mintákban reakcióvázlat készít reakcióelegyet 10,00 0,4 0,5 RT-mix RT-G-mix-1 reverz transzkriptáz (MMLV), április 3 8 3 2 4, 6 4,, 0 5,0 5. Adjunk hozzá 10 μl elkészített reakciókeveréket az elkészített csövekhez. 1. táblázat 6. Adjon hozzá 10 μl RNS-mintákat a klinikai és kontroll mintákból a készre szabott kémcsövekhez a címke szerint. Keverjük össze óvatosan az örvényen, és csöpögünk a cseppekből a cső kupakjából. FIGYELEM! A RIBO-Sorb reagenskészlet segítségével izolált RNS-minták hozzáadásakor el kell kerülni, hogy a szorbens a reakcióelegybe kerüljön. B. A fordított transzkripciós reakció végrehajtása 1. Helyezze a csöveket a termociklerbe (termosztát) 37 ° C-on 30 percig. FIGYELEM! Amikor beállítására a reverz transzkripciós reakciót cyclers a detektáló rendszer „valós időben” kell programozni a készüléket a program végrehajtása (lásd. Táblázat. 2 és a „Útmutatás a kit detektálására használt reagenssel és differenciálódását virális genotípusok a hepatitis C (HCV) klinikai mintákban polimeráz láncreakcióval (PCR) a hibridizációs-fluoreszcens detektálás „AmpliSens HCV-genotípus-FL» », kialakítva FBUN Epidemiology CRI). 2. táblázat 4 térfogat reagensek bevezetett mutatjuk száma alapján a minták (1 klinikai minták és RNS izolálás szakaszban kontroll) és az állomány 1 mintát. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 16. oldal 32. oldal

17 Format FRT program reverz transzkripció termociklerek a detektáló rendszer „valós időben” reakció 5 Lépés Hőmérséklet, C Idő fluoreszcens mérési ciklusok száma 1 perc 2. befejeződése után a reakció cső adjunk hozzá 20 mikroliter DNS-pufferben, egy új Minden egyes minta esetében egy szűrővel ellátott csúcs. Keverjük óvatosan az örvényre és kicsapjuk a cseppeket a cső kupakjából. A reverz transzkripciós reakcióban kapott kdnk-t PCR-amplifikációhoz alkalmazzuk. A kész kábítószer kdnk legfeljebb 16 ° C hőmérsékleten tárolható 1 héten keresztül, vagy az év során legfeljebb 68 ° C hőmérsékleten. Az amplifikációt a detektálás „valós időben” előállítása A. kémcsövek amplifikálására a választott csövek amplifikáció függ a thermocycler. Reagensek behelyezéséhez a kdnk mintát és a kontrollmintákat csövekbe, eldobható tippeket használjuk szűrőkkel. A reakcióelegy teljes térfogata 25 μl, beleértve a 10 μl minta kdnk térfogatát. FIGYELEM! A reakcióelegy komponenseit közvetlenül a PCR-vizsgálat elvégzése előtt el kell keverni. Összekeverve a reagenseket, alapján a szükséges számú reakciók, beleértve a vizsgálati a vizsgálati és kontroll minták szerint a számított szükséges táblázatot (lásd. Táblázat. 3, 4). A1. Előállítása csövek amplifikációs kitet használva "PCR kit" reagensek variáns FRT-G1-4 például 5, Rotor-Gene 3000 vagy 6000 (Corbett Research, Ausztrália); Rotor-Gene Q (Qiagen, Németország); iq5 (Bio-Rad, USA); Mx3000P (Stratagene, USA); „DT-96” ( „DNS-technológia”, Oroszország) és az ajánlott FBUN CRI Járványtani iránymutatások a használja ezt a reagenskészlet. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 17/32

18 FORMAT FRT 1. előtt felolvasztani, alaposan keverjük össze, vortexelje valamennyi kit reagensekkel és üledék esik a cső sapkák. 2. Válasszuk ki a szükséges számú tesztcsövet az amplifikációhoz, figyelembe véve a teszt- és kontrollminták számát (az RNS-extrahálás egy vezérlése, két erősítő kontroll). A csövek típusát az alkalmazott műszertől függően kell kiválasztani. FIGYELEM! Mindegyik mintát három reakcióelegy alkalmazásával elemezzük, ezért mindegyik minta esetében három tesztcsövet kell készíteni. Amikor berendezés alkalmazásával rotációs típusú csövek jelölje „obraztsa_1b / 3a», «obraztsa_1a / 2" és a "obraztsa_vko / 4", ill. A síkágyas eszközök használatakor jelöléssel ellátott állványt használjon. 3. Válasszon három 0,5 ml-es csövet a reakcióelegyek elkészítéséhez. Az "1b / 3a", "1a / 2" és "VKO / 4" vizsgálati csöveket fel kell címkézni. 4. A mindhárom kémcsövek készítésére szánnak a reakcióelegy, hogy az arány a reakció 1: 5 l A RT-PCR mix-2-FEP / FRT, 0,5 l-polimeráz (TaqF) és 10 ul a megfelelő PCR-mix -1-FRT HCV genotípus (lásd. táblázatot is. 3.), a PCR-mix-1-FRT HCV genotípusok 1b / 3a vezetünk be a csőbe «1b / 3a» stb A kapott reakcióelegyet vortexezzük és kicsapjuk a cső kupakjából. FIGYELEM! A reakcióelegyeket 1 minta tartalékával kell elkészíteni (lásd a 3. táblázatot). 5. Adjunk hozzá 15 μl elkészített reakcióelegyet az amplifikációra szánt kémcsövekhez, a jelölésnek megfelelően. az "1b / 3a" reakcióelegyet a "minta-1b / 3a" jelzésű csövekbe, stb. 6. Az elkészített csövek Adagoljunk a reakcióelegyet összhangban jelöléssel hozzáadása 10 ul cDNS-t kapott mintákban a reverz transzkripciós reakció, minden minta, beleértve az extrakciós negatív kontroll (C-), szükséges a 3 tartalmazó ampullákat reakciót Dispense keverékek "1b / 3a", "1a / 2" és "VKO / 4". 7. Tedd a kontroll reakciók szerint: a) PCR-negatív kontroll (K) add tartalmazó csövekbe reakcióelegyeket Adagoljuk «1b / 3a», «1a / 2" és a "SAI / 4" 10 ul TE-pufferben. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 18/32

19 FORMAT FRT b) pozitív kontroll PCR (K + 1b / 3a) tartalmazó csőbe a reakcióelegyet «1b / 3a” adjunk hozzá 10 ul cDNS-FFP HCV genotípusok 1b / 3a; c) PCR-pozitív kontroll (C + 1a / 2) tartalmazó csőbe a reakcióelegyet «1a / 2" add 10 ul cDNS-FFP HCV genotípus 1a / 2; d) A PCR pozitív kontroll (C + EKR / 4) a cső tartalmazó reakcióelegy "SAI / 4" adjunk hozzá 10 ul FFP HCV cDNS EKR / genotípus 4. reakcióvázlat készül reakcióelegyeket a variáns FRT reagens térfogat per reakció (l) No. No. klinikai vizsgálati minták pont 6 10,00 5,00 6 0,50 számos klinikai minták + 1 kontroll RNS extrakciós lépésben 2 PCR + kontroll (N + 3, N számú klinikai minták). PCR-keverék-1- FRT HCV genotípus * RT-PCR keveréket-2- FEP / FRT * 3. táblázat polimeráz (TaqF) *,,,,,,,,, 0 * kötetei beadagolt reagensek egy mozgásteret által adott 1 mintában. A2. Előállítása kémcsöveket amplifikációval a sor „PCR kit” reagensek variáns FRT-g megkezdése előtt kiolvasztására, alaposan keverjük össze, vortexelje valamennyi kit reagensekkel és üledék esik a cső sapkák. 2. Válasszuk ki a szükséges számú tesztcsövet az amplifikációhoz, figyelembe véve a teszt- és kontrollminták számát (az RNS-extrahálás egy vezérlése, két erősítő kontroll). A csövek típusát az alkalmazott műszertől függően kell kiválasztani. FIGYELEM! Mindegyik mintát négy reakcióelegy alkalmazásával elemezzük, ezért minden egyes mintához 4 tesztcsövet kell készíteni. Amikor a 0,2 ml-es csövekben forgócső jel „obraztsa_1b / 3a» eszközök "obraztsa_1a / 2", "obraztsa_vko / 4" és "obraztsa_5a / 6", sorrendben. Síkágyas típusú eszközök használata esetén, vagy ha sztrippelt 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER /

20 FORMAT FRT kémcsövek rotor típusú műszerekhez ilyen célra egy jelentős állványt használnak. 3. Válasszon négy 0,5 ml-es csövet a reakcióelegyek előállításához. Jelölje meg az "1b / 3a", "1a / 2", "VKO / 4" és "5a / 6" csöveket. 4. Az egyes négy cső készítésére szánt a reakció keverékek, hogy az arány a reakció 1: 5 liter RT-PCR-mix-2- FRT HCV genotípus (lásd még a 4. táblázatot..), A PCR-1- FRT HCV 1b / 3a genotípusokat az "1b / 3a" csőbe, stb. A kapott reakcióelegyet vortexezzük és kicsapjuk a cső kupakjából. A rendszer előállítására a reakcióelegyeket variáns FRT per reakció-térfogat reagens (l) No. No. klinikai vizsgálati minták pont 7 10,00 5,00 0,50 FEP / FRT, 0,5 l-polimeráz (TaqF) és 10 ul a megfelelő PCR-mix -1- PCR-keverék-1- FRT HCV genotípus * RT-PCR keveréket-2- FEP / FRT * 4. táblázat polimeráz (TaqF) *,,,,,,,,, 0 * felsorolt ​​összegek reaktánsok bevezetni a árrést 1 mintát. 5. Adjunk hozzá 15 μl elkészített reakcióelegyet az amplifikációra szánt kémcsövekhez, a jelölésnek megfelelően. az "1b / 3a" reakcióelegyet a "minta-1b / 3a" jelzésű csövekbe, stb. Ha a lecsupaszított csövek amplifikációját alkalmazzuk a reakcióhoz, a reakciókeveréket a 2. ábrán bemutatott séma szerint kell bevezetni. 7 A klinikai minták száma + 1 kontroll az RNS + 2 PCR kontroll extrakciós stádiumában (N + 3, N klinikai minták száma). 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 20. oldal 32

21 FORMAT FRT 4 felhasznált csövek beállítására klinikai mintát keveréket «1b / 3a» előállítása «1a / 2" keverék "SAI / 4" keverék "5a / 6" A keverék«1b / 3a»előállítása« 1a / 2" keverék " VKO / 4 »Keverék« 5a / 6 »1. ábra A reakcióelegyek és minták bevezetésére szolgáló rendszer, amikor csupasz csöveket használnak a PCR előállításához. 6. Az elkészített csövek Adagoljunk a reakcióelegyet összhangban jelöléssel hozzáadása 10 ul cDNS-t kapott mintákban a reverz transzkripciós reakció, minden minta, beleértve az extrakciós negatív kontroll (C-), kell tenni a 4 tartalmazó csövekbe reakciót Dispense keverékek "1b / 3a", "1a / 2", "EKO / 4" és "5a / 6". 7. Tedd a kontroll reakciók szerint: a) PCR-negatív kontroll (K) add tartalmazó csövekbe reakcióelegyeket Adagoljuk «1b / 3a», «1a / 2", "SAI / 4" és "5a / 6" 10 ul TE pufferben. b) pozitív kontroll PCR (K + 1b / 3a) tartalmazó csőbe a reakcióelegyet «1b / 3a” adjunk hozzá 10 ul cDNS-FFP HCV genotípusok 1b / 3a; c) PCR-pozitív kontroll (C + 1a / 2) tartalmazó csőbe a reakcióelegyet «1a / 2" add 10 ul cDNS-FFP HCV genotípus 1a / 2; d) A PCR pozitív kontroll (C + EKR / 4) a cső tartalmazó reakcióelegy "SAI / 4" adjunk hozzá 10 ul FFP HCV cDNS EKR / 4 genotípusú növények; d) A PCR pozitív kontroll (C + 5a / 6) a csövet a reakcióelegyet «5a / 6" adjunk hozzá 10 ul cDNS-FFP HCV genotípusok 5a / 6. B. levezetése amplifikációs kimutatási „valós időben” készülék 1. Program (cycler a detektáló rendszer „valós időben”), hogy hajtsa végre a megfelelő amplifikálására és kimutatására szolgáló fluoreszcens jel a program „AmpliSens-1” (lásd. Táblázat. 5, 6 ). 5. táblázat 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 21. oldal, 32

22 FORMAT FRT «AmpliSens-1„Program forgó készülékek 8 Hőmérséklet Időtartam mérése száma C lépés fázisú ciklus fluoreszcens Tartás / Tartás min 1 Temp-ry 95 5 kerékpározás / 5 kerékpáros 95 5 kerékpározás 2 / FAM / zöld 40 kerékpározás 2 JOE / Sárga a 6. táblázat A „AmpliSens-1” egy tablet-típusú eszközök 9 és az eszköz a Smart Cycler II (Cepheid, USA) lépés hőmérséklete Időtartam mérési számot lépésben ciklusok fluoreszcencia min (900-10) a 95 s 5 másodperccel a FAM, JOE / HEX / Cy a 2. A tesztcsöveket helyezze a műszer reakciómoduljának celláiba. 3. Indítsa el az erősítő program végrehajtását a fluoreszcens jel észlelésével. 4. A program befejezése után kezdje el az eredmények elemzését és értelmezését. AZ EREDMÉNYEK ELEMZÉSE ÉS ÉRTELMEZÉSE Az eredmények elemzése a PCR valós idejű detektálásához használt eszköz szoftverével történik. Görbék elemeztük felhalmozódása a fluoreszcens jel a csatorna a fluorofor FAM (vagy hasonlók), és a csatorna a fluorofor JOE (vagy hasonló). Az eredményeket értelmezni alapján a jelenléte (vagy hiánya) a 8. példa, Rotor-Gene 3000 vagy 6000 (Corbett Research, Ausztrália), Rotor-Gene Q (Qiagen, Németország). 9 Ilyen például az iq5 (Bio-Rad, USA); Mx3000P, Mx3005 (Stratagene, USA); „DT-96” ( „DNS-technológia”, Oroszország) és az ajánlott FBUN CRI Járványtani iránymutatások a használja ezt a reagenskészlet. 10 A Smart Cycler II-hez (Cepheid, USA). 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 22. oldal, 32

23 FORMAT FRT kereszteződés görbe fluoreszcencia telepített megfelelő szinten küszöb vonala, amely érzékeli a jelenléte (vagy hiánya) a minta értékek cDNS küszöbérték ciklus Ct a megfelelő oszlopban az eredmény táblázatban. Az eredmény az amplifikációs csatorna pozitívnak tekintjük, ha a fluoreszcens görbe egy tipikus valós idejű PCR S-alakú formában, egyszer metszi küszöb vonala jelentős fluoreszcencia növekedését, negatív hiányában egy görbe egy tipikus alakú, és a keresztezi a küszöb vonala (nincs érték Ct, vagy Cp) és minden más esetben megkérdőjelezhető. A 7. táblázat azokat a csatornákat mutatja be, amelyeken keresztül minden egyes reakcióelegyhez HCV genotípusokat mutatnak ki. 7. táblázat A reakcióelegyet «1b / 3a» «1a / 2" "SAI / 4" "5a / júniusi 11" Channel kimutatható genotípusok HCV FAM / zöld 1b 1a ASD 5a JOE / HEX / Sárga / Cy3 3a számviteli eredményeket a kontroll mintákban Eredmények A PCR-vizsgálatok akkor tekinthetők megbízhatónak, ha az ellenőrzési reakciók eredményeinek értékelési táblázata szerint (lásd a 8. táblázatot) a kontrollminták átadásának helyes eredményeit kapjuk. 11 Az FRT-g1-6 PCR-készlet verziójában. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 23/32

24 FORMAT FRT reakcióképes Nye elegyet kontroll OK K K + 1b / 3a ellenőrzési eredmények különböző szakaszaiban az elemzés FAM / Zöld Nincs érték Ct értéket nem Ct a határérték alá 8. TÁBLÁZAT «1b / 3a» «1a / 2" „SAI / 4 »« 5a / 6 '12 eredményei erősítés csatorna JOE / HEX / Sárga / Cy3 FAM / Zöld JOE / HEX / Sárga / Cy3 FAM / Zöld JOE / HEX / Sárga / Cy3 FAM / Zöld JOE / HEX / Sárga / Cy3 Nincs jelentősége ct NO cT értéket a határérték alá K + 1a / 2 * * NO cT értéke NO cT érték NO cT érték NO cT érték a határérték alá nem ct érték otsuts tvuet értéke Ct NO CT értéke NO CT érték Nem Ct érték Nem Ct érték Nem Ct érték * * * * * * alatti határérték határérték alá K + EKR / 4 * * * * * * * * alatti határérték határérték alatti K + 5a / 6 * * * * * * * Ezt a reakcióelegyet nem vizsgálták. * * A határérték alatt VIGYÁZAT! A Ct határértékeit a PCR készletben lévő betétben jelöljük. Az eredmények értelmezése A klinikai mintáknál a határérték alá 1. HCV genotípus jelen van a mintában révén jön létre összehasonlítása az amplifikációs a három eredmény (a „PCR kit” variáns FRT-G1-4) vagy négy cső ( „PCR készlet” FRT-g1-6 variáns) az 1. táblázat szerint. 7, ahol a) Ha a táblázat az eredmények egy minta meghatározott értéke Ct, egy megfelelő genotípus HCV RNS, majd visszatér az eredmény a „genotípus”; b) Ha a táblázat az eredmények a két minta vagy több Ct értékeket határoztuk meg, majd ez adott egy két-, három, és így tovább. d. genotípus. Kivételt képez ez alól a következő esetben: Ha a minta meghatározott értéke Ct a reakcióelegyhez „SAI / 4” csatorna JOE / HEX / Sárga / Cy3 (4 HCV genotípus) és a «1b / 3a» reakcióelegyet csatorna FAM / zöld (1b genotípus HCV), ahol a Ct értékeket a 4. genotípus nagyobb Ct érték az első genotípus 10 vagy több cikluson, kiadott 12 része a PCR kit variáns FRT-g1-6. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 24/32

25 FORMAT FRT eredmény "Genotípus 4". A 2. táblázat Ha az eredmények Ct értékét meghatározzuk a mintában csak a SAI (reakcióelegy „SAI / 4», FAM / zöld csatorna), és nem éri el a határértéket a bélés, az eredmény adott «HCV genotípus nem határoztuk meg”. Így, ha ismert, hogy a koncentráció a HCV RNS a mintában belül van az analitikai érzékenység a reagensek, az eredmény adott «HCV genotípus nem határoztuk meg, mert alacsony a vírusterhelés”. 3. Ha a táblázat az eredmények a minták nem Ct értékek minden genotípus és a CT-érték EKR (FAM csatorna PCR-mix-1-FRT HCV EKR / genotípus 4) nincs definiálva, vagy meghaladja a határ (jelzett a betét), majd a meg kell ismételni a minta PCR-vizsgálatát, kezdve az RNS extrakciós lépéssel. FIGYELEM! 1. Ha a Ct érték legalább egy mintát a pozitív kontroll PCR lépésben (K + 1b / 3a, K + 1a / 2, K + EKR / 4 vagy K + 5a / 6) meghaladja a határértéket a bélés vagy hiányzik, szükséges ismételje meg a PCR-próbát az összes minta esetében, kezdve az extrahálási lépéssel. 2. Ha a negatív kontroll RNS-extrakcióhoz (OK) legalább egy a reakció keverékek «1b / 3a», «1a / 2», «5a / 6" bármelyike ​​a használt csatornákat és / vagy a„SAI / 4, a reakcióelegyet „csatorna észlelt pozitív JOE / HEX / Sárga / Cy3 jel, ismételje PCR minden vizsgálati minták, amelyek ezt a reakcióelegyet a HCV genotípus határoztuk lépésben RNS extrakcióval. 3. Ha egy negatív PCR kontroll (K) bármely reakcióelegyet bármelyike ​​szerinti a csatornák által van detektálva, pozitív jel, ismételje PCR minden vizsgálati minták, amelyek ezt a reakcióelegyet a HCV genotípus határoztuk lépésben RNS extrakcióval. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / oldal 25/32

26 eltarthatóság, a szállítás és a tárolás körülményeit eltartható. 12 hónap A lejárati időtartamú reagensek készlete nem alkalmazható. Eltarthatóságát reagensek megfelel a nyitott nyomtatott dátum a címkéket, bontatlan reagenseket, hacsak nem a tanításra. Transportation. A reagens készletet legfeljebb 5 napig 2-8 ° C hőmérsékleten kell szállítani. Amikor beérkezik, szétszerelje a megadott tárolási hőmérsékletnek megfelelően. Tárolás. Reagensek "ribo-Sorb" és a "ribo-prep" tárolt 2 és 8 ° C Kits reagensek „Reverte-L» és «PCR kit”, kivéve OKO, TE pufferben, és EKR STI-248-rec tárolására hőmérsékleten nem magasabb, mint mínusz 16 C OKO, TE pufferben, és EKR STI-248-rec a "PCR kit" tárolt 2 és 8 ° C A PCR-elegyet-1-FRT HCV genotípusok 1b / 3a PCR-keverék-1-FRT HCV genotípusok 1a / 2, a PCR-mix-1-FRT HCV EKR / 4 genotípusú, és PCR-keverék-1-FRT HCV genotípusok 5a / 6 tároljuk sötét helyen. A szabadság feltételei. Kezelésre, megelőző és egészségügyi létesítményekre. Panaszok a minőség egy sor „AmpliSens a HCV-genotípus-FL» reagensek irányul, hogy a gyártó FBUN Központi Kutató Intézet Epidemiológiai (Ul. Novogireevskaya, d. 3a) az osztály munkáját a követelések és képzési szervezetek (tel. (495) fax: (495), visszajelzéseket és javaslatokat a termékkel kapcsolatban "AmpliSens" hagyhatja, egy űrlap kitöltése honlapján a fogyasztó: 2 (RG, iQ, Mx, DT, SC) / VER / oldal 26 32.

27 Függelék 1. extrakciója RNS extrakció alkalmazásával RNS „ribo-Sorb” reagenskészlet Eljárás 1. lizáló oldatot és a mosófolyadékot 1 (ha át tároltuk 2-8 ° C), a meleg 60 ° C hőmérsékleten, amíg a teljes oldódás a kristályok. 2. Válassza ki az eldobható mérőcsövek előírt számát 1,5 ml-rel (beleértve a negatív kivonásszabályozót is). Jelölje ki a tesztcsöveket. 3. Az egyes csövek alján 10 μl EKO STI-248-rec-t adjon hozzá. 4. Adjon 450 μl lízisoldatot a kémcsövekhez. Jelölje ki a tesztcsöveket. Megjegyzés A nagy mintatérfogat megkönnyítése izolálási eljárást kell keverni egy külön lombikban lizáló oldat és EKR STI-248-rec (egy mintán alapul 450 ul lízis-oldatot és 10 l EKR STI-248-rec), majd távolság 450 ul előkészített 1,5 ml-es csövekbe. 5. Adjon 100 μl mintát a vizsgálati csövekhez lízisoldattal és VKO-val, a szűrővel ellátott csúcsokat használva. Negatív kontroll (OK) extrakciós csőben adjunk hozzá 100 μl OKO-t. 6. Jól záró mintát vortexeléssel alaposan megkeverjük, és protsentrifugirovat 5 másodpercig 5000 fordulat / percen keresztül mikrocentrifugában, hogy eltávolítsuk csepp a belső felülete a cső fedél. 7. A szuszpenziót szuszpendáljuk, erőteljes keveréssel az örvényre. Adjunk hozzá 25 μl újraszuszpendált szorbent minden egyes csőhöz külön tiptal. 8. Keverje össze az örvénykamra tartalmát, hagyja szobahőmérsékleten 10 percig, alaposan összekeverve 2 percenként. 9. Centrifugálja a mikrocentrifuga csövekbe 7 th g (például 10 ezer fordulat / perc MiniSpin Centrifuga, Eppendorf) 1 percig. 10. Vegye ki a felülúszót minden egyes csőből egy külön hegyes vákuum szívóegységgel. 11. Adjunk hozzá 400 μl mosóoldatot a kémcsövekhez 1. Keverjük az örvényt addig, amíg a szorbens teljesen újraszuszpendálódik. Centrifugáljuk a csöveket egy mikrocentrifugában 7000 g-vel 1 percig. Válassza ki a 2x felülúszót (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 32. oldal

28 RNS EXTRAKCIÓ minden egyes csőből, külön vájat segítségével, vákuum szívóegységgel. 12. 500 μl mosóoldatot adunk a csövekhez 3. keverjük össze az örvényt, amíg a szorbens teljes újra reszuszpendálódik. Centrifugáljuk a csöveket egy mikrocentrifugában 7000 g-vel 1 percig. Válasszon ki egy oldatot minden csőből 3 külön mosással, vákuum szívóegységgel. 13. Adjunk 400 μl mosóoldatot a 4 csövekhez. Keverjük az örvényt addig, amíg a szorbens teljesen újraszuszpendálódik. Centrifugáljuk a csöveket egy mikrocentrifugában 7000 g-vel 1 percig. Teljesen vegye le a 4 mosóoldatot az egyes csövekről külön vájat segítségével, vákuum szívóegységgel. 14. Szorítsa le a szorbent úgy, hogy a csöveket nyitott fedéllel egy termosztátba helyezi 60 ° C-os hőmérsékleten 15 percig. 15. Reszuszpendáljuk a szorbent 50 μl RNS pufferben. Melegítsük fel a sütőt hőmérsékleten 60 C-on 2 percig, vortexeléssel kevertetjük, majd centrifugáljuk, hogy kicsapjuk a szorbens 12 ezer g (például, fordulat / perc MiniSpin Centrifuga, Eppendorf) 1 percig. FIGYELEM! Az eredményül kapott RNS-készítmény nem tárolható, a reverz transzkripciós reakciót közvetlenül az RNS-minta után kell elvégezni. A reakciót nagyon óvatosan vegye be a reakcióba, a szorbens befogása nélkül. Abban az esetben, ha a szorbens zavaros, szükségessé válik a centrifugában kicsapódni. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 28. oldal 32. oldal

29 Függelék 2 extrakciója RNS extrakció alkalmazásával RNS-készlet „ribo-prep” reagensek Eljárás 1. Lysis Solution (ha-on tároltuk 2 és 8 ° C), a meleg 65 ° C hőmérsékleten, amíg a teljes oldódás a kristályok. 2. Válasszuk ki az eldobható mérőcsövek előírt számát 1,5 ml-rel (beleértve a negatív és a pozitív extrakciós kontrollokat). 3. Az egyes csövek alján 10 μl EKO STI-248-rec-t adjon hozzá. 4. Adjon 300 μl lízisoldatot a kémcsövekhez. Jelölje ki a tesztcsöveket. Megjegyzés A nagy mintatérfogat megkönnyítése izolálási eljárást kell keverni egy külön ampullában lízis és EKR STI-248-rec (egy mintán alapul 300 ul lízis és 10 ul EKR STI-248-rec), majd távtartó 300 ml keveréket az előkészített 1,5 ml-es csövekbe. 5. A lízishez és a VKO-hoz való oldatból álló csövekhez adjunk 100 μl mintát a tippekkel a szűrő segítségével. Negatív kontroll (OK) extrakciós csőben adjunk hozzá 100 μl OKO-t. 6. A csöveket vortexeléssel alaposan megkeverjük, protsentrifugirovat 5 másodpercig egy mikrocentrifugában, hogy eltávolítsuk csepp a belső felületén a fedelet, és melegedni 5 percig 65 C-os inkubátorban. 7. Adjunk 400 μl csapadékoldatot a kémcsövekhez, alaposan keverjük össze a vortexel. 8. Centrifugálja a csöveket egy mikrocentrifugában 12 000 g-nál (például fordulatszámot MiniSpin centrifugához, Eppendorf) 5 percig. 9. Óvatosan távolítsa el a felülúszót az üledék megérintése nélkül, vákuumszívó segítségével és minden egyes minta külön csúcsával. 10. Adjon 500 μl mosóoldatot a 3 kémcsövekhez, szorosan zárja le a fedeleket, óvatosan mossa le az üledéket, és 3-5 alkalommal forgassa el a kémcsöveket. Az összes csövet egyidejűleg elvégezheti, ezért a csöveket fedőlapon vagy más állványon felülről le kell fedni egy állványon, nyomja meg őket és fordítsa meg az állványt. 11. Centrifugáljuk 12 000 g-en 1-2 percen át egy mikrocentrifugában. 12. Óvatosan, az üledék rögzítése nélkül válassza ki a felülúszót, 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 29. oldal 32

30 RNS KIVONÁS vákuum szívóegységgel és külön mintával minden egyes minta esetében. 13. Adjon 200 μl 4-es mosóoldatot a vizsgálati csövekhez, zárja le szorosan a fedőt és óvatosan mossa le a pelletet úgy, hogy a csöveket 3-5 alkalommal megfordítja. Az összes csövet egyidejűleg elvégezheti, ezért a csöveket fedőlapon vagy más állványon felülről le kell fedni egy állványon, nyomja meg őket és fordítsa meg az állványt. 14. Centrifugáljuk 12 000 g-vel 2 percig egy mikrocentrifugában. 15. Óvatosan, az üledék rögzítése nélkül gondosan válassza ki a felülúszót vákuum szívóegységgel és külön mintát minden egyes minta esetén. 16. Helyezze a csöveket egy termosztátba 65 ° C hőmérsékleten 5 percig, hogy az iszapot szárítsa (a csövek nyitott állapotában). 17. Adjon 50 μl RNS-puffert a csövekhez. Keverjük fel az örvényt. Helyezzen egy termosztátot 65 ° C-on 5 percig, időnként rázza az örvényre. 18. Centrifugáljuk a csöveket 12 000 g-vel 1 percig egy mikrocentrifugában. A felülúszó tisztított RNS-t tartalmaz. A minták készen állnak a reverz transzkripció és a PCR reakciójára. FIGYELEM! Az eredményül kapott RNS-készítmény nem tárolható, a reverz transzkripciós reakciót közvetlenül az RNS-minta után kell elvégezni. 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 30. oldal 32. oldal

31 NYOMTATOTT TERMÉKEKBEN HASZNÁLT SZIMBÓLUMOK Cikkszám Batch Code Figyelmeztetés! Lásd a mellékelt dokumentáció maximális számú vizsgálati termék in vitro diagnosztikai használatra eddig a hőmérséklet változására határ-hőmérséklet felső határa, olvassa el a használati utasítás kerülje a napfényt gyártás időpontja Gyártó 2 (RG, iQ, Mx, DT, SC) / VER / p 31/32

32 Issue az LA IVI helye megváltozik Footer Footer Sheet lényege a változások a változások hozzáadott katalógus szám R-V1-G (1-4) - 2 (RG, iQ, Mx, Dt, SC), hogy alkossanak meg 3 Vegye katalógusszámával az 1. és a 4. készítmény esetében 2x (RG, iQ, Mx, Dt, SC) / VER / 32. oldal 32. oldal

Amplisense hcv fl

A hepatitis szakaszai c
Mpiviropack ár

Minden a hepatitis C-ről

Kezelés, tünetek, gyógyszerek

Hepatitis rcc amplicon hcv fl

Hepatitis rcc amplicon hcv fl

A májgyulladást a máj akut és krónikus gyulladásos betegségeinek nevezik, amelyek nem fókuszálódnak, hanem gyakoriak. A különböző hepatitisben a fertőzés módszerei eltérőek, eltérnek a betegség progressziójának, a klinikai megnyilvánulásoknak, a módszereknek és a terápia prognózisának arányában is. Még a különböző típusú hepatitisek tünetei is különböznek. Néhány tünet súlyosabb, mint mások, amelyet a hepatitis típus határoz meg.

A fő tünetek

  1. Sárgulásmérő. Gyakran előfordul a tünet, és annak oka, hogy a bilirubin májkárosodásban szenvedő beteg vérébe lép. A testen keresztül keringő vér szerveket és szöveteket hordoz, sárga színben.
  2. A fájdalom megjelenése a megfelelő hipokondrium régiójában. Ez a máj méretének növekedése miatt keletkezik, ami a fájdalom megjelenéséhez vezet, amely tompa, hosszantartó vagy paroxizmusa.
  3. Az egészség romlása, melyet láz, fejfájás, szédülés, emésztési zavarok, álmosság és letargia kísér. Mindez a bilirubin testre gyakorolt ​​hatásának a következménye.

Hepatitis akut és krónikus

A hepatitis a betegeknél akut és krónikus formában van. Akut formában manifesztálódnak vírusos májkárosodás esetén, valamint mérgezés különböző típusú mérgekkel. A betegség akut formáiban a betegek állapota gyorsan romlik, ami hozzájárul a tünetek gyorsabb fejlődéséhez.

A betegség ezen formájával kedvező előrejelzések lehetségesek. Kivéve annak krónikus átalakulását. Akut formában a betegség könnyen diagnosztizálható és könnyebben kezelhető. A kezeletlen akut hepatitisz krónikus formában fejlődik ki. Néha súlyos mérgezés esetén (pl. Alkohol) a krónikus forma önmagában fordul elő. A hepatitis krónikus formájánál a májsejtek kötőszövetének helyettesítő folyamata zajlik le. Gyengén expresszálódik, lassú, ezért néha továbbra is diagnosztizálatlan marad a májcirrózis kezdetéig. A krónikus hepatitist rosszabbul kezelik, és a gyógyulásának prognózisa kevésbé kedvező. Az akut betegség lefolyása jelentősen romló egészségi, sárgaság alakul ki, mérgezés jelenik meg, a kilépési munka csökkenti a máj bilirubin emelkedett a vérben. A hepatitis akut formában történő időben történő kimutatásával és hatékony kezelésével a beteg leggyakrabban visszatér. A betegség több mint hat hónapig tartó időtartamával a hepatitis krónikus formát ölt. A krónikus formája a betegség vezet komoly zavarok a szervezetben - megnövekedett a lépben és a májban történő metabolizmus zavart, komplikációk merülnek fel, mint a májcirrózis és a rák kialakulását. Ha a beteg a csökkent immun terápiás rend helyes megválasztásával, vagy alkohol-függőség, az átmenet a krónikus formája hepatitis veszélyeztetik a beteg életét.

A hepatitis típusai

A hepatitisnek több típusa van: A, B, C, D, E, F, G, vírusos hepatitisnek is nevezik, mert előfordulásuk oka a vírus.

Ezt a típusú hepatitiset Botkin-betegségnek is nevezik. 7 nap és 2 hónap közötti inkubációs időtartam van. A kórokozó - RNS-vírus - betegségtől egészséges személyig terjedhet gyenge minőségű termékeken és vízen keresztül, kapcsolatba léphet a háztartási tárgyakkal, amelyeket a beteg használ. A hepatitis A három formában lehetséges, a betegség megnyilvánulásának erejéig vannak felosztva:

  • akut formában sárgaság, a máj súlyosan megsérült,
  • amikor sárgás nélküli szubakut, beszélhetünk a betegség könnyebb verziójáról,
  • szubklinikus formában nem észlelheti a tüneteket, bár a fertőzött a vírus forrása, és képes mások fertőzésére.

Ezt a betegséget szérum hepatitisznek is nevezik. A máj és a lép emelkedése, az ízületi fájdalom megjelenése, hányás, hőmérséklet, májkárosodás társul. Akut vagy krónikus formában áramlik, amelyet a beteg betegségének állapota határoz meg. A fertőzés módjai: az egészségügyi szabályok megsértése, szexuális együttérzés, vérátömlesztés alatt, rosszul fertőtlenített orvosi eszközök használata. Az inkubációs időtartam 50 ÷ 180 nap. A hepatitis B előfordulási gyakorisága a vakcinázással csökken.

Ez a fajta betegség az egyik legsúlyosabb betegség, mivel gyakran cirrhózis vagy májrák társul, ami halálos kimenetelhez vezet. A betegség rosszul reagál a kezelésre, sőt, volt beteg egyszer hepatitis C, egy személy lehet kötni, hogy újra fertőzés ugyanaz a betegség. Heal megoldani HCV: hepatitis C után a betegség az akut formában vissza 20% -ában, és a betegek 70% -a test önmagában nem képes visszaállítani a vírust, és a betegség krónikussá válik. Annak megállapítása, hogy miért vannak meggyógyultak, és mások nem, de mégsem lehetséges. A hepatitis C krónikus formája önmagában nem tűnik el, ezért kezelni kell. Diagnózis és kezelés az akut HCV hordoz fertőző betegségek orvos, krónikus formája a betegség - hepatológus vagy gasztroenterológus. Akkor megfertőződhet során transzfúziót plazma vagy vér fertőzött donor, használatával rosszul kezelt Medinstrument, szexuálisan, és a beteg anyja átadja a fertőzést a gyermek számára. Hepatitis C vírus (HCV) fertőzés gyorsan terjed szerte a világon, a betegek száma már régen meghaladta 150.000.000 ember. Korábban a HCV nem terjeszkedett a terápiában, de most a betegség korszerű, közvetlen hatású antivirusokkal gyógyítható. Csak ez a terápia igen drága, mert nem mindenki engedheti meg magának.

Ez a típusú hepatitis D csak akkor lehetséges, ha a hepatitis B vírussal fertőzött (együttes fertőzés - egy sejt különböző típusú vírusokkal történő fertőzésének esetére). Mellette a májkárosodás és a betegség akut lefolyása. A fertőzés módjai - a betegség vírusának az egészséges ember véréből való átvétele a vírus hordozótól vagy egy beteg személytől. Az inkubációs idő 20-50 napig tart. Kívülről a betegség folyamata hasonlít a hepatitis B-re, de formája nehezebb. Krónikus lesz, miután cirrhózisba kerül. A hepatitis B-hez hasonló védőoltást végezhet.

Ez kissé hasonlít a hepatitis A-re az átvitel útja és mechanizmusa miatt, mivel ez is pontosan átjut a véren keresztül. Különlegessége a villámgyors formák kialakulása, amely 10 napot meg nem haladó ideig halálos következményekkel jár. Más esetekben hatékonyan gyógyítható, és a hasznosítási prognózis gyakran kedvező. Kivétel lehet a terhesség, mivel a gyermek elvesztésének veszélye közel 100%.

Az ilyen típusú hepatitist még nem vizsgálták. Az egyetlen ismert, hogy a betegség által okozott két különböző vírus: az egyik izolált véradó, egy második az ürülékben található kapó betegek hepatitis után vérátömlesztés. Tünetek: sárgaság, láz, ascites (folyadékgyülem a has), megnagyobbodott máj és lép, növekedése a bilirubin és máj enzimek, az esemény a változások a vizeletben és a székletben, valamint általános mérgezés. A hepatitis F kezelés hatékony módszereit még nem fejlesztették ki.

Ez a típusú hepatitis hasonló a hepatitis C-hez, de nem olyan veszélyes, mivel nem járul hozzá a cirrhosis és májrák előfordulásához. A cirrózis csak a hepatitis G és C együttes fertőzése esetén jelentkezhet.

diagnosztika

A vírusos hepatitis hasonló a tüneteihez hasonlóan, akárcsak más vírusfertőzésekhez hasonlóan. Ezért nehéz pontosan meghatározni a beteg diagnózisát. Ennek megfelelően a hepatitis típusának és a terápia helyes céljának tisztázása érdekében laboratóriumi vérvizsgálatokra van szükség az egyes vírusfajtákra specifikus markerek mutatók azonosítására. Miután meghatározták az ilyen markerek jelenlétét és arányukat, meg lehet határozni a betegség állapotát, annak aktivitását és lehetséges kimenetelét. A folyamat dinamikájának nyomon követése érdekében a felmérés megismétlődik.

Hogyan kezelik a hepatitis C-t?

A jelenlegi kezelési rendek krónikus HCV csökken a kombinált antivirális terápia beleértve antivirusniki közvetlen működésű típusúak sofosbuvir, velpatasvira, daklatasvira, ledipasvira különböző kombinációkban. Néha a ribavirin és az interferonok is hozzáadódnak hatékonyságuk fokozásához. A hatóanyagok ezen kombinációja megakadályozza a vírusok replikációját, megtakarítva a májat a pusztító hatásuktól. Az ilyen terápiának számos hátránya van:

  1. A hepatitis vírus elleni küzdelemre szánt gyógyszerek költsége magas, nem mindenki tudja megvásárolni.
  2. Bizonyos gyógyszeres kezelést kellemetlen mellékhatások kísérnek, beleértve a láz, émelygés, hasmenés.

A hepatitis krónikus formáinak kezelésének időtartama több hónapról egy évre szól, a vírus genotípusától, a szervezet károsodásának mértékétől és a felhasznált szerektől függően. Mivel a hepatitis C elsősorban a májra hat, a betegeknek szigorú étrendet kell követniük.

A HCV genotípusok jellemzői

A hepatitis C az egyik legveszélyesebb vírusos hepatitis. A betegséget az Flaviviridae nevű RNS-tartalmú vírus okozza. A hepatitis C vírust "gyengéd gyilkosnak" is nevezik. Olyan elhanyagolható epitét, amelyet azért kapott, mert a kezdeti szakaszban a betegséget semmilyen tünet nem kíséri. Nincsenek klasszikus sárgaság jelei, nincs fájdalom a megfelelő hipoondrium területén. Határozza meg, hogy a vírus jelenléte nem lehet korábban, mint néhány hónappal a fertőzés után. És mielőtt ez nem teljesen reagál az immunrendszerre és lehetetlen kimutatni a markerek a vérben, ezért nincs genotipizálási lehetőség. A HCV sajátossága az is, hogy a vérkeringésnek a reprodukciós folyamat során való bejutása után a vírus gyorsan változik. Az ilyen mutációk zavarják a fertőzött immunrendszert, hogy beállítsák és küzdjenek a betegséggel. Ennek eredményeképpen a betegség több évet is igénybe vehet tünetek nélkül, amely után majdnem cirrózis vagy malignus tumor jelenik meg. És az esetek 85% -ában az akut forma betegsége krónikussá válik. A hepatitis C vírusnak fontos szerepe van - a genetikai struktúra sokfélesége. Tény, hogy a hepatitis C a vírusok gyűjteménye, amelyeket strukturális változataik szerint soroltak fel, és amelyeket genotípusokra és altípusokra osztottak fel. A genotípus az örökletes tulajdonságokat kódoló gének összege. Míg az orvostudomány a hepatitis C vírus 11 genotípusát ismeri, amelyeknek saját altípusuk van. A genotípust 1-től 11-ig terjedő számokkal jelölték (bár klinikai vizsgálatokban főleg az 1 ÷ 6 genotípust használják), és az altípusok a latin ábécé betűit használva:

A különböző országokban a HCV genotípusai különböző módon oszlanak meg, például Oroszországban leggyakrabban az elsőtől a harmadikig megtalálható. A betegség lefolyásának súlyossága a genotípus típusától függ, meghatározzák a terápia rendjét, időtartamát és a kezelés eredményét.

Ahogy a világ terjed a HCV törzsek

A Hepatitis C genotípusok heterogén módon oszlanak el a világon, az 1., 2. és 3. genotípus leggyakrabban megtalálható, és egyes területeken ez a következőképpen néz ki:

  • Nyugat-Európában és keleti régióin az 1. és 2. genotípus a leggyakoribb,
  • az Egyesült Államokban az 1a. és az 1b. altípus,
  • Észak-Afrikában a leggyakoribb a 4. genotípus.

A potenciális HCV-fertőzés kockázati övezetében vérbetegségben szenvedők (hematopoietikus rendszeri daganatok, hemofília stb.), Valamint a dialízis részlegek gyógymódjában fekvő betegek. A leggyakoribb a világon az 1. genotípus - ez számít

Az ügyek teljes számának 50% -a. Másodszor a prevalencia - 3. genotípus, valamivel több mint 30% -kal. A HCV Oroszországban elterjedt területe jelentős eltérést mutat a világ vagy az európai lehetőségekkel:

  • az 1b genotípus számol

Az esetek 50% -a,

  • a 3a genotípusra

    20%

  • a hepatitis 1a fertőzött

    A betegek 10% -a,

  • a 2. genotípusú hepatitist találtam

    De nem csak a genotípus függ a HCV terápia nehézségétől. A kezelés hatékonyságát a következő tényezők is befolyásolják:

    • a betegek életkora. A fiatalok gyógyításának esélye sokkal magasabb,
    • a nők könnyebben gyógyíthatóak, mint a férfiak,
    • a májkárosodás fontos mértéke - az eredmény előnye magasabb, kevesebb károsodással jár,
    • a vírusterhelés nagysága - annál kevesebb vírus a testben a kezelés idején, annál hatékonyabb a terápia,
    • a beteg súlya: annál nagyobb, annál bonyolultabbá válik a kezelés.

    Ezért a kezelési rendszert a kezelőorvos választja ki, a fenti tényezők alapján, az EASL (Európai Májbetegség Egyesület) genotipizálása és ajánlása alapján. Az EASL ajánlja, hogy ajánlásai naprakészek legyenek, és új gyógyszerek jelenjenek meg az ajánlott hepatitisz C kezelésekkel.

    Ki veszélyezteti a HCV fertőzést?

    Mint ismeretes, a hepatitis C vírus átjut a véren keresztül, és ezért a legvalószínűbb a fertőzés:

    • akik vérátömlesztést kapnak,
    • betegek és ügyfelek a fogorvosi és egészségügyi intézményekben, ahol helytelenül sterilizálják az orvostechnikai eszközöket,
    • a nem steril eszközök miatt veszélyes lehet a manikűr és a szépségszalon,
    • a rosszul kialakított szerszámok is szenvednek szerelmeseinek piercing és tetoválás,
    • a fertőzés kockázata magas azok között, akik a nem steril tűk ismételt felhasználása miatt gyógyszereket használnak,
    • a magzat fertőződhet a hepatitis C-vel fertőzött anyától,
    • a szexuális bizonyítvánnyal vagy a fertőzéssel kapcsolatban az egészséges szervezet szervezetéhez is juthat.

    Mi a kezelés a hepatitis C kezelésére?

    A hepatitis C vírus nem volt hiábavalónak tekinthető "gyenge" vírusölőnek. Ez évekig nem nyilvánul meg, majd hirtelen komplikációk formájában jelenik meg, amit cirrhosis vagy májrák okoz. De a HCV diagnózisa több mint 177 millió embert hozott a világon. A 2013-ig alkalmazott kezelés, az interferon és a ribavirin együttes injekciója 40-50% -ot meg nem haladó gyógyulást eredményezett a betegeknél. Sőt, súlyos és fájdalmas mellékhatások kíséretében jártak. A helyzet megváltozott nyarán 2013. miután farmgigantom amerikai Gilead Sciences szabadalmaztatott sofosbuvir anyag kiszabadul a gyógyszer formájától márkanév alatt Sovaldi, amely áll a 400 mg hatóanyagot. Ez lett az első közvetlen hatású vírusellenes gyógyszer (PDPD) a HCV ellen. A klinikai vizsgálatok eredménye sofosbuvir elégedett az orvosi hatékonyság, ami úgy érhető összefüggő genotípusa szerinti értéke 85 ÷ 95%, míg a időtartamát a terápia folyamán végzett kezeléssel összehasonlítva interferon és ribavirin, több, mint a felére csökkent. És miközben drugmaker sofosbuvir szabadalmaztatta Gilead-ben szintetizált 2007-ben Michael Sofia, alkalmazottja a cég Pharmasett szerzett utólag Gilead Sciences. Michael nevéből az általa szintetizált anyagot sofosbuvirnak hívták. Magát Michael Szófia együtt tudósok egy csoportja, akik egy sor felfedezések, amelyek feltárják a természet HCV, ezáltal hatásos gyógyszer a kezelésére, megnyerte a Lasker-DeBakey klinikai orvosi kutatás. Nos, egy új hatékony eszköz megvalósításának nyeresége majdnem minden a Gileadhoz ment, amely a Sovvaldi monopóliumára szabott. Ezenkívül a cég különleges szabadalmakkal védte meg fejlesztését, amely szerint a Gilead és néhány partnervállalata tulajdonosa az eredeti PFDP gyártásának kizárólagos jogainak. Ennek eredményeként a Gilead érkezett csak az első két évben a végrehajtás a kábítószer többször blokkolt minden kiadást, amely a vállalat felmerült megszerzése Pharmasett, megszerzése a szabadalom és az azt követő klinikai vizsgálatokban.

    Mi az a Sofosbuvir?

    Ennek a gyógyszernek a hatékonysága a HCV elleni küzdelemben olyan magas volt, hogy alkalmazásának szinte semmilyen terápiás rendszere nem teljes. A Sophosbuvir monoterápiára nem ajánlott, de összetett használat esetén rendkívül magas eredményeket mutat. Kezdetben a gyógyszert ribavirinnel és interferonnal kombinációban használták fel, ami egyszerűen csak 29 hét alatt lehetővé tette a gyógyulást. És ez annak ellenére, hogy csak az interferon és a ribavirin terápia volt a fele olyan hatékony, és időtartamuk néha meghaladta a 40 hét. 2013 után minden egyes következő évben új híreket mutattunk ki a hepatitis C vírus elleni küzdelemben egyre több új gyógyszerről:

    • 2014-ben megjelentek daklatasvir,
    • 2015 volt a születési év ladypasvira,
    • 2016 elégedett volt a velpatasvira létrehozásával.

    A Daklataswirt a Bristol-Myers Squibb 60 mg aktív hatóanyagot tartalmazó Daklinza készítményként adta ki. A két következő anyagot a Gilead tudósok erői hozták létre, és mivel egyik sem volt alkalmas monoterápiára, csak a gyógyszereket használták a sofosbuvirral kombinálva. A Gilead terápia bevezetésének megkönnyítése érdekében az újonnan létrehozott gyógyszer azonnal felszabadul, a sophosbuvir-szal együtt. Tehát voltak előkészületek:

    • Harvoni, kombinálva a sophosbuvir 400 mg-ot és a ladypasvir 90 mg-ot,
    • Epclusa, amelybe a sofosbuvir 400 mg és a velpatasvir 100 mg volt.

    A daklatasvira alkalmazásával kétféle Sowaldi és Daklinsu készítményt kellett előkészíteni. A hatóanyagok egyes párosított kombinációit a HCV egyes genotípusainak kezelésére alkalmazták az EASL által ajánlott terápiás kezeléseknek megfelelően. És csak a sophosbuvira és a velpathasvir kombinációja vált pangenotipikus (univerzális) orvosságnak. Az eclusus meggyógyította a hepatitis C genotípusát, gyakorlatilag ugyanolyan nagy hatásfokkal, mintegy 97 ÷ 100% -kal.

    A generikumok megjelenése

    Klinikai vizsgálatok megerősítették a kezelés hatékonyságát, de ezek nagyon drog volt egy hátránya - túl magas árak, amelyek nem teszik lehetővé, hogy megvásárolja a nagy ügyek. Monopolisztikusan magas árak a termékek által létrehozott Gilead, felháborodást váltott ki, és a botrány, hogy történt szabadalom tulajdonosai, hogy bizonyos engedményeket, így néhány vállalat India, Pakisztán, Egyiptom és az engedélyek a termelés analógok (generikumok) annyira hatékony és népszerű gyógyszerek. Sőt, a szabadalmi birtokosokkal folytatott küzdelem, amely az előretolt árak kezelésére szolgáló gyógyszereket kínál Indiával élve, olyan országként, amelyben több millió krónikus hepatitis C-ben élnek. Ennek eredményeként ez a harc - Gilead kiadott 11 engedélyből az indiai vállalatok és a szabadalmi fejlesztése önkioldó sofosbuvir először, majd a többi új gyógyszerek. Miután megkapta az engedélyt, az indiai gyártók gyorsan létrehozták a generikumok termelését, és megalkották az előállított termékeket saját márkaneveikkel. Így először a Soveneri jenerkiki, majd a Daklinza, a Harvoni, az Epclusa és az India lett a világ vezető gyártója. A licencszerződés alapján indiai gyártók a megszerzett eszközök 7% -át fizették ki a szabadalmi birtokosok javára. De még ezekkel a kifizetésekkel is, az Indiában gyártott generikumok költsége tízszer kisebb volt, mint az eredetiké.

    A cselekvési mechanizmusok

    Amint azt korábban már említettük, a HCV terápia újonnan megjelenő újdonságai a PFDD-vel kapcsolatosak, és közvetlenül befolyásolják a vírust. Bár a korábban alkalmazott kezeléssel alkalmazott ribavirin interferon megerősítette az emberi immunrendszert, segítve ezzel a szervezetnek a betegség ellenállását. Mindegyik anyag a maga módján jár a víruson:

    1. A Sofosbuvir blokkolja az RNS polimerázt, ezáltal gátolja a vírus replikációját.
    1. A Daklatasvir, a lepidavir és a velpathaswir NS5A inhibitorok, amelyek megakadályozzák a vírusok terjedését és az egészséges sejtekbe való belépést.

    Az ilyen irányú hatás lehetővé teszi a HCV-vel való sikeres küzdelmet, a soplassbuvir terápiához való alkalmazását, amely a daklatasvirral, a ledipasvirral, a velpatasvirral párosítva van. Néha a vírusra gyakorolt ​​hatás fokozásához egy harmadik komponenst adnak a pároshoz, amely leggyakrabban a ribavirin.

    Az indiai generikumok termelői

    Az ország cégei az általuk kiadott engedélyeket használják, és most India gyártja az alábbi generikusokat: Sovaldi:

    • A Hepcvir a Cipla Kft. Gyártója,
    • Hepatinat - Natco Pharma Ltd.,
    • Cimivir - Biocon Kft. # 038, Hetero Drugs Ltd.,
    • A MyHep a Mylan Pharmaceuticals Private Ltd.,
    • SoviHep - Zydus Heptiza Ltd.,
    • A Sofovir a Hetero Drugs Ltd.,
    • Resof - gyártja a Dr Reddy # 8217, s Laboratories céget,
    • Virso - kiadja a Strides Arcolab-ot.

    A Daklinsa analógok Indiában is előállnak:

    • Natdac a Natco Pharma cégtől,
    • Dacihep Zydus Heptizától,
    • Daclahep a Hetero Drugs-tól,
    • Dactovin a Strides Arcolab-ból,
    • Daclawin a Biocon ltd. # 038, Hetero Drugs Ltd.,
    • Mydacla a Mylan Pharmaceuticals cégtől.

    A Gilead után az indiai kábítószer-gyártók is elsajátították a Harvoni termelését, ami ilyen generikumokat eredményezett:

    • Ledifos - kiadja Hetero,
    • Hepcinat LP - Natco,
    • Myhep LVIR - Mylan,
    • Hepcvir L-Cipla Kft.
    • Cimivir L-Biocon ltd. # 038, Hetero Drugs Ltd.,
    • LediHep - Zydus.

    És 2017-ben már megkezdődött a következő indiai generikumok előállítása:

    • A Velpanat kiadta a Natco Pharma gyógyszergyártó céget,
    • release A Velasof elsajátította a Hetero Drugs,
    • A SoviHep V-t Zydus Heptiza indította el.

    Amint látja, az indiai gyógyszeripari vállalatok nem elmaradnak az amerikai gyártóktól, és gyorsan felismerik az újonnan kifejlesztett gyógyszereket, miközben megvizsgálják az összes minőségi, mennyiségi és terápiás jellemzőt. Ezenkívül, beleértve a farmakokinetikai bioekvivalenciát az eredetivel kapcsolatban.

    A generikumok követelményei

    Egy generikus nevű gyógyszer, amely képes alapvető gyógyszerek helyettesíteni az alapvető farmakológiai tulajdonságokkal rendelkező szabadalmat. Lehetővé tehetők mind licenc jelenlétében, mind hiányában, csak annak rendelkezésre állása teszi lehetővé az előállított analóg licencet. Abban az esetben, ha engedélyt adtak az indiai gyógyszergyártóknak, a Gilead átadta nekik a gyártástechnológiát, és megadta az engedélyesek jogosultságát egy független árpolitikához. Annak érdekében, hogy egy gyógyszer-analóg általánosnak tekinthető legyen, meg kell felelnie számos paraméternek:

    1. A készítmény legfontosabb gyógyszerészeti összetevőinek arányát minőségi és mennyiségi normák szerint kell megfigyelni.
    1. Tartsa be a vonatkozó nemzetközi szabványokat.
    1. A megfelelő termelési feltételek kötelező betartása szükséges.
    1. A készítményekben meg kell őrizni a szívó paraméterek ekvivalens ekvivalensét.

    Érdemes megjegyezni, hogy az Egészségügyi Világszervezet elkötelezte magát a gyógyszerek hozzáférhetőségének védelme mellett, amely a költségvetési generikumok segítségével drága gyógyszerekkel helyettesít.

    Egyiptomi generikus sophosbuvira

    Ellentétben Indiával, az egyiptomi gyógyszergyártók nem törtek ki a világ vezetőjévé a hepatitis C genetikáinak előállításában, bár a sofosbuvir analógjainak gyártását elsajátították. Igaz, az általuk készített analógok nagy része nem engedélyezett:

    • Az MPI Viropack a Marcyrl Pharmaceutical Industries gyógyszereket gyártja # 8229, az egyik legkorábbi egyiptomi generikus,
    • A Pharmed Healthcare által kiadott Heterosofir. van az egyetlen engedélyezett generikus Egyiptomban. A hologram alatt található csomagoláson olyan kód van elrejtve, amely lehetővé teszi a termék eredetiségének ellenőrzését a gyártó weboldalán, ezzel kizárva annak hamisítását,
    • Grateziano, gyártó: Pharco Pharmaceuticals,
    • Sofolanork, a Vimeo által gyártott,
    • A Sofocivir által gyártott ZetaPhar.

    Generikus gyógyszerek Banglades hepatitis kezelésére

    Egy másik ország, amely nagy mennyiségben termel genetikai anyagokat a HCV ellen, Banglades. Sőt, ez az ország nem is igényel engedély gyártására analógok márkás gyógyszerek, mert 2030-ig lehetővé tette a gyógyszeripari cégek, hogy bemutassa azokat a gyógyászati ​​készítmények nem megfelelő engedélyezési dokumentumok. A legismertebb és szerelve a legmodernebb technológia egy gyógyszerészeti cég Beacon Pharmaceuticals Ltd. A termelési kapacitások projektjét európai szakemberek hozták létre, és megfelelnek a világszínvonalú előírásoknak. A Beacon a következő generikumokat termeli a hepatitis C vírus kezelésére:

    • A Sofora, a sophosbuvira generikus gyógyszere 400 mg hatóanyagot tartalmaz. Ellentétben a 28 darabos palackban lévő hagyományos csomagolással, a Sophoral 8 tablettát tartalmazó buborékcsomagolás formájában készül egy lemezben,
    • A Daclavir egy daklatasvira generikus, a gyógyszer egy tabletta 60 mg hatóanyagot tartalmaz. Hidegek formájában is felszabadítják, de minden lemez 10 tablettát tartalmaz,
    • Sofosvel - generikus Epclusa, tartalmaz sofosbuvir velpatasvir 400 mg-os és 100 mg-os. Pangenotipny (többféle) gyógyszerrel kezelésében hatékony HCV genotípusok 1 ÷ 6. Ebben az esetben, nincs szokásos csomagolási fiolákba, tablettákat bliszter csomagolásba 6 darab minden lemezen.
    • A Darvoni egy összetett készítmény, amely kombinálja a somosbuvir 400 mg-ot és a daklatasvir 60 mg-ot. Szükség esetén kombináljuk a sofosbuvir és a daklatasvir terápiát más gyártó készítmények alkalmazásával, ezért mindenféle tablettát kell bevinni. Beacon pedig egy tablettába rakta őket. A Darvoni 6 lapos buborékfóliába van csomagolva, egyetlen lemezen, csak exportra küldve.

    A Beacon-tól származó gyógyszerek vásárlásakor a terápia során figyelembe kell venni a csomagolás eredetiségét a kezeléshez szükséges mennyiség megvásárlásához. A leghíresebb indiai gyógyszergyártók A fent említettek szerint, miután az ország gyógyszeripari cégei engedélyt kaptak a generikus gyógyszerek előállítására a HCV terápiához, India világelsővé vált a termelésben. De a sok cég közül érdemes megemlíteni néhányat, amelyek termékei Oroszországban a leghíresebbek.

    Natco Pharma Kft.

    A legnépszerűbb gyógyszeripari vállalat Natco Pharma Kft, a gyógyszerek, amelyek életét mentette több tízezer esetben krónikus formája hepatitis C. elsajátította a termelés szinte az egész sort a vírusellenes szerek közvetlen tevékenység, beleértve sofosbuvir a daklatasvirom és ledipasvir a velpatasvirom. Natco Pharma megjelent 1981-ben a város Hyderabad kezdőtőkével 3,3 millió. Rúpia, míg a foglalkoztatottak száma elérte a 20 főt. Most Indiában öt vállalat mintegy 3500 embert foglalkoztat, és más országokban is fióktelepek vannak. A termelési osztályokon kívül a cég jól felszerelt laboratóriumokkal rendelkezik, amelyek lehetővé teszik a modern gyógyszerek kifejlesztését. Saját fejlesztései közül érdemes megjegyezni, hogy a kábítószerek a rák ellen küzdenek. Az egyik legismertebb gyógyszer ezen a területen a Veenat, amelyet 2003 óta gyártanak és leukémiában használják. Igen, és a generikumok felszabadítása a hepatitis C vírus kezelésére a Natco egyik kiemelt területe.

    Hetero Drugs Ltd.

    Ez a vállalat célja a generikumok előállítása, amely alárendelte ezt a vágyat saját iparágak hálózatába, beleértve a fióktelepekkel és laboratóriumi irodákkal rendelkező gyárakat. A Hetero termelési hálózat börtönbe kerül a gyógyszerek előállítására a vállalat által megszerzett engedélyek alapján. Tevékenységének egyik iránya olyan gyógyszerek, amelyek lehetővé teszik a súlyos vírusos megbetegedések elleni harcot, melynek kezelését sok beteg számára az eredeti gyógyszerek magas költsége miatt lehetetlenné tette. A megszerzett licenc lehetővé teszi a Hetero számára, hogy gyorsan elindítsa a generikus gyógyszereket a betegek számára megfizethető áron. A Hetero Drugs létrehozása 1993-ban nyúlik vissza. Az elmúlt 24 évben egy tucat gyár és több tucat termelési egység jelent meg India területén. Saját laboratóriumok jelenléte lehetővé teszi a vállalat számára, hogy kísérleti munkát végezzen az anyagok szintézisével kapcsolatban, amelyek hozzájárultak a termelési bázis bővítéséhez és a gyógyszerek külföldi országokba történő aktív exportjához.

    Zydus Heptiza

    A Zydus egy indiai vállalat, amelynek célja egy egészséges társadalom kialakulása, amely tulajdonosai szerint az emberek életének jobb színvonalának megváltozását fogja követni. A cél nemes, és ennek elérése érdekében a vállalat aktív oktatási tevékenységet folytat az ország lakosságának legszegényebb szakaszaira. A népesség hepatitis B. elleni ingyenes vakcinázásával a Zidus az indiai gyógyszerpiac termelésének tekintetében negyedik helyen áll. Emellett termékeinek 16-át szerepelt az indiai gyógyszeripar 300 esszenciális gyógyszereinek listáján. A Zydus termékek nem csak a hazai piacon keresnek, hanem bolygónk 43 országának gyógyszertárainál is megtalálhatók. És a 7 vállalatnál gyártott gyógyszerek választéka meghaladja a 850 készítményt. Az egyik legerősebb termelési létesítménye Gujarat állam, és a legnagyobb nemcsak Indiában, hanem Ázsiában is.

    HCV terápia 2017

    A hepatitis C kezelési rendjeit minden egyes beteg esetében az orvos külön-külön választja ki. A kezelés helyes, hatékony és biztonságos kiválasztásához az orvosnak tudnia kell:

    • a vírus genotípusa,
    • a betegség időtartama,
    • májkárosodás mértéke,
    • cirrhosis jelenléte / hiánya, egyidejű fertőzés (pl. HIV vagy más hepatitis), a korábbi kezelés negatív tapasztalata.

    Miután az elemzés ciklusa után ezeket az adatokat megkapta, az orvos az ajánlások alapján az EASL-et választja a terápia legmegfelelőbb változatának. Az EASL ajánlásait évről évre korrigálják, és új gyógyszereket adnak hozzá. Mielőtt új terápiát ajánlana, azokat a kongresszushoz vagy egy különleges értekezlethez kell benyújtani. 2017-ben az EASL rendkívüli ülésén az ajánlott rendszerek naprakésszé tétele Párizsban történt. Úgy döntöttek, hogy teljesen abbahagyják az interferon terápia alkalmazását a HCV kezelésében Európában. Ezenkívül nem volt egyetlen javasolt rendszer egyetlen közvetlen hatású gyógyszerrel. Íme néhány ajánlott kezelési lehetőség. Mindegyiket csak referenciaként adják meg, és nem válhat a cselekvés irányadójává, mivel a terápia kijelölését csak orvos adhatja meg, amelynek felügyelete alatt később elmúlik.

    1. Az EASL által javasolt hepatitis C monoinfekció vagy egyidejű HIV + HCV fertőzés esetén javasolt kezelési módok azoknál a betegeknél, akiknél nincs cirrózis, és akiket korábban nem kezeltek:
    • kezelésre az 1a. és 1b. genotípusok használhatja:

    # 8229, sofosbuvir + ledipasvir, ribavirin nélkül, időtartam 29 hét, # 8229, sophosbuvir + daklatasvir, ribavirin nélkül is, a kezelés időtartama 29 hét, # 8229, vagy a sofosbuvir + velpatasvir ribavirin nélkül, a tanfolyam időtartama 29 hét.

    • terápiával genotípus 2 a ribavirin alkalmazása nélkül 29 hétig alkalmazható:

    # 8229, sofosbuvir + dklatasvir, # 8229, vagy sophosbuvir + velpathaswir.

    • a kezelésben 3. genotípus a ribavirin alkalmazása nélkül, 29 hetes kezelésre:

    # 8229, sophosbuvir + daklutasvir, # 8229, vagy a sofosbuvir + velpatasvir.

    • terápiával 4. genotípus ribavirin nélkül alkalmazható 29 hétig:

    # 8229, sofosbuvir + ledipasvir, # 8229, sophosbuvir + daklutasvir, # 8229, vagy a sofosbuvir + velpatasvir.

    1. Ajánlott EASL-terápiás kezelések hepatitis C monoinfekcióval vagy egyidejűleg HIV / HCV fertőzéssel kompenzált cirrhosisos betegeknél, akik korábban nem kezeltek:
    • kezelésre az 1a. és 1b. genotípusok használhatja:

    # 8229, sofosbuvir + ledipasvir ribavirinnel, időtartam 29 hét, # 8229, vagy 24 hétig ribavirin nélkül, # 8229, és egy másik lehetőség - 24 hét a ribavirinnel, amely a válasz kedvezőtlen prognózisa, # 8229, sophosbuvir + daklutasvir, ha ribavirin, majd 24 hét, és a ribavirin egy 29 hetes kezelést követően, # 8229, vagy sofosbuvir + velpatasvir ribavirin nélkül, 29 hétig.

    # 8229, sofosbuvir + dklatasvir a ribavirin és a ribavirin kombinációja 29 héten át, valamint a ribavirin 24 hetes kedvezőtlen prognózisa miatt, # 8229, vagy sophosbuvir + velpathaswir a ribavirin kombináció nélkül 29 hétig.

    # 8229, sophosbuvir + daklatasvir 24 hétig ribavirinnel, # 8229, vagy a sofosbuvir + velpatasvir újra ribavirinnel, a kezelés időtartama 29 hét, # 8229, mint egy változat lehetséges софосбувир + велпатасвир 24 hét, de már nincs рибавирина.

    • terápiával 4. genotípus ugyanazokat a módszereket alkalmazzák, mint a genotípusok esetében 1a és 1b.

    Amint láthatja, a terápia eredményét befolyásolja az előírt gyógyszerek kombinációja a beteg állapota és a test sajátosságai mellett. Ezenkívül a kezelés időtartama az orvos által kiválasztott kombinációtól függ.

    A HCV modern gyógyszereivel való kezelés

    Az orvos által orálisan naponta egyszer előírt közvetlen vírusellenes hatású tablettákat készítsen. Nem osztottak részekre, nem rágják, egyszerű vízzel mossák. Ez a legjobb, ha egyszerre megy, ezért tartósan koncentráljon a hatóanyagok testében. A táplálékfelvétel idõzítéséhez nem szükséges a legfontosabb dolog - ne tegye üres gyomorra. A gyógyszerfelvétel megkezdése után figyeljen az egészségi állapotra, mivel ebben az időszakban a legegyszerűbb észlelni a lehetséges mellékhatásokat. Maguknak nem sok PDPD van, de a komplexben felírt gyógyszerek sokkal kisebbek. Leggyakrabban a mellékhatások:

    • fejfájás
    • hányás és szédülés,
    • általános gyengeség,
    • az étvágy romlása,
    • fájdalom az ízületekben,
    • a biokémiai vérszintek változása, a hemoglobin alacsony szintje, a vérlemezkék és a limfociták csökkenése.

    Káros mellékhatások lehetségesek kisszámú beteg esetén. Ugyanakkor minden bejelentett betegséget be kell jelenteni a kezelőorvosnak a szükséges intézkedések megtételére. Annak érdekében, hogy ne növelje a mellékhatásokat, az alkoholt és a nikotint ki kell zárni, mivel káros hatással vannak a májra.

    Ellenjavallatok

    Bizonyos esetekben a PDPD elfogadása kizárt, a következőket érinti:

    • a betegek egyéni túlérzékenysége a gyógyszerek egyes összetevőire,
    • 18 évesnél fiatalabb betegek, mivel nincsenek pontos adatok a szervezetre gyakorolt ​​hatásukról,
    • a magzat és a szoptatós csecsemők,
    • a nőknek megbízható fogamzásgátló módszereket kell alkalmazniuk a terápia időtartama alatt a fogamzás elkerülése érdekében. Ez a követelmény vonatkozik a nőkre is, akiknek a partnerei szintén PADA terápián mennek keresztül.

    Tárolja a közvetlen cselekvés elleni vírusellenes szereket a gyermekek számára hozzáférhetetlen helyen és a közvetlen napfény hatásait. A tárolási hőmérsékletnek 15 ÷ 30 ° C tartományban kell lennie. Gyógyszerek szedése esetén ellenőrizze a gyártási és tárolási idejét a csomagoláson. A lejárt gyógyszerek tilosak. Hogyan lehet PPPD-t vásárolni az orosz állampolgároknak Sajnos nem találhatók az indiai generikumok az orosz gyógyszertárakban? A Gilead gyógyszergyár, amely engedélyt adott a készítmények előállítására, óvatosan tiltotta exportját számos országba. Beleértve az összes európai országot. Azok, akik a hepatitisz C ellen küzdő indiai generikumokat kívánják megvásárolni, számos módot kihasználhatnak:

    • rendelje meg őket az orosz online gyógyszertárakban, és a szállítási helytől függően néhány órát (vagy napot) kap. És a legtöbb esetben még az előlegfizetésre sem lesz szükség,
    • rendelje meg azokat az indiai online áruházakban, házhozszállítással. Előlegfizetést igényel pénznemben, és a várakozási idő három héten keresztül egy hónapra szól. Ráadásul felveszi a kapcsolatot az eladóval angolul,
    • menj el Indiába és hozd magadnak a drogot. Ezen túl, ez időt vesz igénybe, valamint a nyelvi akadályok, valamint a bonyolultsága tesztelése eredetisége vásárolt áruk gyógyszertárban. Minden mást adunk a probléma önálló export, amely előírja, hűtőláda, a jelenléte az orvos által felírt és angol, valamint a csekk másolata.

    Azok, akik érdeklődnek a gyógyszerek vásárlásától, maguk döntenek arról, hogy melyik lehetséges választási lehetőség közül választhatnak. Ne felejtsük el, hogy a HCV esetében a terápia kedvező kimenetele a kezdetétől függ. Itt szó szerinti értelemben a halál késleltetése hasonló, ezért nem érdemes késleltetni az eljárás kezdetét.