PCR hibák lehetségesek? Hamis negatív és hamis pozitív PCR eredmények

Tünetek

Ahhoz, hogy hamis eredményt PCR diagnosztika - mind a fals pozitív és fals negatív - hatással lehet a különböző körülmények között.

Alkalmazása polimeráz-láncreakció - PCR - szigorú betartását minden szakaszában az elemzés, az elemzést kerítés orvos a értelmezését az elemzés eredményeit. Mennyire informatív a PCR-elemzés sok körülménytől függ.

  • Az elemzés hamis pozitív eredménye az anyag (pl. A húgyhólyag elszíneződése vagy kaparása) bejutását eredményezheti.
  • Hasonló álpozitív PCR eredmény nem kapunk anyag belépne a hámsejtek, valamint a nagy mennyiségű nyálka teljesen informatív.
  • A hamis DNS-elemzések eredményét a kapott minták helytelen szállítása és tárolása befolyásolja. A DNS-fertőzés ebben az esetben megsemmisíthető, következésképpen - hamis negatív eredmény.
  • A PCR-diagnosztika során a sterilitási rendellenességek egy másik oka a hamis pozitív PCR-nek. Az anyagot hozott vissza a beteg kaphat külföldi baktériumok a kezében egy orvos, ruhát, egy pohár vagy szennyezett eszközök, egyszer használatos eszközök. Ennek eredményeként "nem létező" fertőzést találtak.
  • Nem megfelelő reagensek. Rosszul felszerelt és a régi és poros laboratóriumban alkalmatlansága reagensek orvosok „vak szem” - egy másik komoly ok és pontatlan diagnózis. Természetesen ez jelentősen csökkenti a laboratóriumi diagnosztika költségeit, de nem befolyásolhatja eredményeit.

Annak érdekében, hogy elkerüljék az ilyen hibák, az orvosok az egészségügyi központ „Evromedprestizh” nagyon súlyos megközelítés magatartása laboratóriumi diagnosztika: csak eldobható anyagokat minden szakaszában elemzés megfelelnek a szükséges intézkedéseket a fenntartó teljes sterilitás laboratóriumi és orvosi rendelő. Mi foglalkoztat csak az orvosok, a legmagasabb besorolási és tapasztalt szakemberek, akik rendszeresen javítsák készségeiket, hogy ne kezelje a nem létező betegség, és hogy megbízható eredményeket.

Hamis pozitív PCR eredmény

Előnyei:

  • olcsón orvoshoz érkezve 900 rubel
  • sürgősen A kezelés napján 20 perctől 1 napig elemzik
  • közel 5 percre a Varshavskaja és Chistye Prudy metróállomástól
  • kényelmesen minden nap 9-től 21-ig dolgozunk minden nap (beleértve az ünnepeket is)
  • Névtelenül!

A polimeráz láncreakció talán az egyik legérzékenyebb és legpontosabb módszer a különböző fertőző betegségek, különösen a szexuális úton terjedő betegségek diagnosztizálására. Még kis mennyiségű baktérium, vírus, gombás DNS-részecskék meghatározása is, a PCR meglehetősen specifikus módszer, amely ritkán hamis pozitív eredményeket ad.

A hamis pozitív eredmény azt jelenti, hogy valójában nincs fertőzés, és a reakció pozitív.

Azonban még a 98-99% -os pontossággal, PCR néha rossz válaszok, amelyek szinte soha nem jár a reakciót, de többszöri megsértése az előzetes szakaszban.

A PCR-elemzés hamis pozitív eredményének okai a következők:

  • A szexuális fertőzések kezelését követő kontrollvizsgálatok elvégzésének határideje nem állt fenn. Az a tény, hogy a legtöbb fertőzés a sejtek belsejében vagy a membránok felületén van rögzítve. A teljes kezelés során az STI kórokozója megszűnik, de a genomjának (DNS) részecskéi egy ideig a gazdaszervezetben maradnak. Körülbelül három hétig van szükség, hogy ezek a sejtek helyettesítsék azokat, amelyek nem érintkeztek a fertőző ágenssel, majd az ellenőrzést veszik. Ha vesszük az elemzés előtt, köszönhetően a magas érzékenység, PCR DNS detektálására már elpusztult baktériumok és jelenlétére utal a kórokozó, ami lesz hamis pozitív, mert a fertőzés már meghalt.
    Orvosaink elegendő ismerettel rendelkeznek az STD-k és az öregedés diagnózisának területén, ezért kizártuk a Klinikai magánoktatás ilyen helyzetét.
  • A szexuális úton terjedő fertőzések DNS-je belép a kémcsőbe egy vénorész kezéből, kesztyűből és urológiai próbákból.
    Ez a tényező kizárt, mivel csak egyszeri használatos kesztyűt, vizsgálati csöveket és próbákat használnak az anyag beviteléhez.
  • Rendkívül ritkán van hamis pozitív eredmény, ha a kapszulákban szorosan összefüggő mikroorganizmus van. Vagyis az analizátor egy kórokozó baktérium jelenlétét adta ki, amely egy nemi betegséget okoz, de valójában a normál mikroflóra egyik összetevője. De ez a probléma már régóta megoldódott a modern és specifikus vizsgálati rendszerek bevezetésével.
  • DNS vagy szennyeződés kerüljön a csőbe fertőzések laboratóriumi kutatási stádiumban is, ha ez lehetséges, de gyakorlatilag kizárt megfelelő szervezet folyamat diagnózis és a képzés.

Mindenesetre a diagnózist nem csak egy elemzés eredménye alapján végezzük. A szexuális úton terjedő betegség végső diagnózisa panaszok, klinikai vizsgálat és különböző laboratóriumi és instrumentális módszerek kombinációja.

Ha az urológus, nőgyógyász vagy nemi betegségek szakorvosa tűnik kétségei vannak a helyességét PCR eredmények azt mutatták, eltérés vagy meglévő klinikai és laboratóriumi diagnosztikai adatokat egymással, az orvos mindig javasoljuk további vizsgálatot az ELISA módszerek, NASBA, növényeket, annak érdekében, hogy tisztázza a helyzetet.

Klinikáinkban a modern orvoslás minden módszere megtalálható a férfiak és nők vizsgálatához. Ezért kizárják a TIT-ek hamis diagnózisának létrehozását.

A klinika doktora "Private practice" dermatovenereologist, urológus Volokhov EA a PCR fertőzéses elemzéséről szól.

Orvosi Központ Chistiye Prudy és Varshavka

Fogadás a klinikánkon naponta 9.00 és 21.00 óra között

SAD és SWAD - metró Varshavskaya, Kakhovskaya, Sevastopol - st. Bolotnikovskaya ház 5 épület 2, tel. 8-499-317-29-72

A központban (CAO) - metró Chistye Prudy, Turgenevskaya, Lubyanka - Krivokolenny sávház 10 9. oldal, tel. 8-495-980-13-16

Kérdéseid

Kérdés: Mennyire pontos a PCR-diagnózis?

Mi a PCR-diagnosztika pontossága?


pontosság PCR (polimeráz láncreakció) bizonyos fertőzések esetében 99 és 100 százaléka van.
Rendkívül ritka, hogy a PCR hamis negatív eredményeket ad, és gyakorlatilag nem ad hamis eredményeket. Téves negatív eredmény, amikor az elemzés kimutatja a kórokozó mikroorganizmus hiányát (a fertőzés forrása), akkor amikor valójában az.
Ez akkor fordulhat elő, ha:

  • A biológiai anyagot helytelenül választották ki. Például, ha a citomegalovírus fertőzés vizsgálja a vizeletet (nem a torkon vagy a véren) vagy diagnózis a központi idegrendszer fertőzése (központi idegrendszer) a cerebrospinális folyadék helyett vér.
  • A biomassza gyűjtésére vonatkozó szabályokat nem tartották be. Ha egy személy antibiotikum-terápiát kapott a PCR-vizsgálatok során, ő vett uroseptikumokat és antivirális szereket. Hasonlóképpen, hamis negatív tesztek is lehetnek, ha a kenet vagy a vizelet leadása előtt a beteg vizeletben szexelhetett, vagy vaginális kúpok formájában vett gyógyszertgyertyák).
  • A fertőzés forrását, amely létfontosságú tevékenysége során megváltozhat, meg kell vizsgálni. A mikroorganizmusok szíve a változás képessége. Néhány vírus a DNS szintjén variábilitást nyerhet (dezoxiribonukleinsav). Például az influenzavírusnak nagy a képességük arra, hogy "mutáljon", és megváltoztassa genetikai információit. Így a PCR nem képes felismerni a fertőzés forrását, mivel a genom (gének aggregációja) megváltoztak.

Hamis pozitív eredmény (az elemzés kimutatja a fertőzés jelenlétét, ha nincs jelen) nem jellemző a PCR diagnosztikára, és csak azokban az esetekben fordul elő, amikor a fertőzés már "halott", de halott sejtjei a szervezetben keringenek. Nem lehet megkülönböztetni a "halott" fertőzést és az aktív (élénk) fertőzés a PCR módszer egyik hátránya. Abban az esetben, ha egy személy már fertőzött (a betegséget antibakteriális vagy antivirális szerekkel kezelték és ölték meg), a PCR-analízis még mindig pozitív eredményt ad a patogén mikroorganizmusnak, még akkor is, ha már "halott".

Ha hamis pozitív próba a szifiliszra lehetséges

Elemzés meghatározza a szifilisz, a személy, hogy szinte minden a legnagyobb: a munka vétel, orvosi, a megelőző szűrővizsgálatok, terhesség. Végrehajtja ezeket vizsgálatokra van szükség - lehetővé teszik, hogy azonosítsa a betegség korai szakaszában, amikor a kezelés célja, hogy a legmagasabb hatékonyságot.

A kapott pozitív eredmény gyakran elakad egy embert, különösen ok nélkül. A szifilisz hamis pozitív felismerése elég gyakori előfordulás, ezért nem pánikba esik korán. A különböző forrásokból származó információk szerint az elsődleges vizsgálatok legfeljebb 30% -a eredménytelenül eredményezhet. Ennek a jelenségnek számos oka van: a test állapotának megváltozása, a szomatikus betegségek. Annak érdekében, hogy jobban megértsük, miért jelennek meg, érdemes jobban megérteni a kutatás kérdését.

A szifilisz vizsgálat típusai

A klinikai kutatások módszerei minden évben gyorsan javulnak. Új diagnosztikai módszerek kifejlesztésével kevésbé gyakoriak a szifiliszre vonatkozó hamis pozitív reakciók. Szükség esetén a diagnózis több különböző módszert is tartalmazhat - ez lehetővé teszi a legmegbízhatóbb eredmény elérését.

Nem treponemális kutatási módszerek

Ezek a technikák arra szolgálnak, hogy meghatározzák azokat a fehérjéket, amelyek a halvány spiroketák aktivitásának eredményeként jönnek létre. Céljuk a kórokozó "nyomainak" meghatározása. Az ilyen módszerek viszonylag magas százalékos hiba (legfeljebb 10%). Ezek a technikák nem specifikusak, de lehetővé teszik, hogy az antitest titer meghatározza a fertőzés mértékét.

Wassermann reakció RW

A leggyakoribb elemzés, amely a halvány treponema azonosítására szolgál, a szerológiai szerológiai vizsgálat. A Wasserman reakciója lehetővé teszi számunkra, hogy néhány perc alatt meghatározzuk a betegség jelenlétét. Ezért ezt a technikát leggyakrabban a laboratóriumokban használják - ez nem igényel sok időt és viszonylag alacsony költséggel jár.

Spinalis folyadékot vagy vért használnak az elemzés elvégzéséhez. A mintavételező anyagot az ujjából lehet bevinni (ha csak egy elemezhető) vagy a vénából (ha több tanulmány szükséges). Ennek eredményeképpen az elemzés nemcsak hamis pozitív, hanem hamis negatív is lehet. A következő esetekben lehetséges:

  • a fertőzés korai szakaszában, amikor a treponem mennyisége még mindig alacsony;
  • krónikus betegség az elengedés szakaszában, amikor az antitestek száma csökken.

Figyelj! A hamis negatív eredmény rendkívül ritkán merül fel, ezért ha van legalább egy plusz négy, akkor további vizsgálatnak kell alávetni.

Az újrahasznosítás mikroresztése (MR)

Ez a vizsgálati módszer az antigén-antitest-reakción alapul. Kis mennyiségű anyagot igényel. Célja az antilipid antitestek kimutatása, amelyek a sejtek treponema általi megsemmisítésének folyamatában keletkeznek. A vizsgálat során mind a páciens vérét, mind a cerebrospinális folyadékot használják.

Mivel a sejtpusztulás nem csak a szifilisz esetében jelentkezik, az elemzés szűrésként és nem megerősítő jellegű. Ennek a technikának két analógja van:

  • Mikroszkópos vizsgálat (VDRL). Az elemzés elvégzéséhez inaktivált vérszérumot alkalmazunk. Ha a szifilisz idegrendszerének gyanúja sérül, a vizsgálati anyagként spinalis folyadékot használnak.
  • Makroszkópos vizsgálat (RPR). Ez a módszer kifejezett diagnosztikának tekinthető. A plazma reaktánsok vizuális számítását alkalmazzák.

Ez a reakció, ha a szükséges sterilitást nem észlelik, hamis pozitív eredményt mutathat. Az ilyen elemzés megjelenése lehetséges a nem specifikus szövetkárosodással is, ami a lipidek pusztulását vonja maga után. Ha van pozitív eredmény, egy kötelező treponemális teszt javasolt megerősítésre.

Treponemális kutatási módszerek

Az elemzések ezen kategóriája a legpontosabb adatokat szolgáltatja, és ritkán hamis pozitív eredmények vannak. A vizsgálatok célja olyan specifikus fehérjék azonosítása, amelyek a szervezet által a fertőzésre adott válaszként felszabadulnak. Ezek a módszerek magasabb költséggel rendelkeznek, ezért megerősítésként használják, nem pedig minősítésre.

A szervezet specifikus antitesteket csak néhány héttel a treponema fertőzés után kezd előállítani. Tartósan fennállhatnak a betegség gyógyítására. Ezért bizonyos vizsgálatok pozitív eredményeket mutathatnak a remisszió után hosszú ideig.

Figyelj! A pozitív RW és a negatív specifikus, a vizsgálat néhány hét elteltével ismételten elvégezhető.

Immunoenzim analízis (ELISA, EIA)

Az IgA, IgB és IgM immunglobulinok szintjének értékelésén alapul. Az első két fajta fehérje a testben 2 hétig terjedő fertőzéssel és az IgM-vel - a fertőzés után egy hónappal.

Az analízis értelmezését az immunglobulinok jelenlétének aránya alapján végezzük:

  • Csak az IgA kimutatható - a fertőzés óta nem több, mint 14 nap eltelt;
  • IgA és IgB fertőzéseket 14 és 28 napja között észleltek;
  • mindhárom típust megtalálta - a szifilisz a szervezetben több mint 28 nap alatt;
  • Csak IgM - késői szifilisz detektálódott.

A jelenléte IgM jele lehet már kikeményített szifilisz - szintézisének immunglobulin IgM lehet több hónapig folytatni remisszió után.

Az immunfluoreszcencia (RIF, FTA)

A fertőzés legkorábbi szakaszában történő megerősítésére szolgál. A vizsgálathoz vért veszünk az ujjakból vagy vénából. Az eredmény hasonló a RW elemzéséhez, ahol a mínusz jelzés látható, vagy 1-től 4 pluszig. Ha van legalább egy plusz, akkor további vizsgálatot lehet rendelni.

Rendkívül ritka, hogy hamis pozitív eredményeket találnak a RIF végrehajtásakor - lehetnek terhes nők, valamint kötőszöveti betegségekben szenvedők.

A passzív agglutináció (TPHA, TPHA)

Az antitestek titere lehetővé teszi a szifilisz és a stádium jelenlétének meghatározását. Meggyőző adatok ez a technika már a fertőzés után 28 nappal ad. Az értékeléshez az ujj vagy a véna vért használják. Az antitestek számának növelése a betegség későbbi szakaszát jelenti.

A legpontosabb kutatási módszerek

Ennek a csoportnak az elemzései rendkívül érzékenyek, ezért az eredmények hibája rendkívül alacsony. Ezeket a költségeket a többi módszerhez képest magasabb költségekkel és a kifinomultabb végrehajtási technikával különböztetik meg.

Polimeráz láncreakció (PCR)

A PCR elemzés az egyik legpontosabb. Célja a patogén DNS területének meghatározása az emberi szervezetben. A módszer speciális felszerelést és reagenseket igényel, ezért ritka esetekben alkalmazzák.

Imunoblotting

Kombinált vizsgálati módszer. Célja az immunglobulinok meghatározása a páciens vérszérumában. Az elemzés során ellenőrzik az antitestek komplexének jelenlétét, amely szerint a diagnózis létrejön. Ebben a technikában elektroforézist alkalmaznak, amellyel elkülönítik az immunrendszert, és ELISA-tesztet, amely különálló pontokat mutat.

A halvány treponémák (RIBT) immobilizálásának reakcióját

Nagyon specifikus elemzés, amely meghatározza a vérszérum halálos treponémia reakcióját. Széles körben használják az egész világon, mert nagy a valószínűsége a pontos eredménynek. A szifiliszben szenvedő betegek speciális antitestjei (immunmotívum) képesek a treponem immobilizálására. Egy egészséges ember vérében nincs ilyen antitest. A kutatási módszertan alapját képező képesség jelenlétéről / hiányáról van szó.

A RIBT-t olyan szifiliszfajták azonosítására használják, amelyekben a Wasserman-reakció negatív eredményt hoz - az idegrendszer, a belső szervek vereségét, a betegség látens formáját. Hamis pozitív eredmény a FÁK-országokban rendkívül ritka. Megjelenése oka sarcoidosis, leprás.

Hamis pozitív eredmények okai

A Wasserman-reakció meghatározhatja az "akut" és "krónikus" hamis pozitív eredményeket. Súlyossága az emberi állapot megváltozásának jellegétől függ. Az RW súlyosbodási stádiuma ilyen esetekben kimutatható:

  • fertőző betegségek a súlyosbodás szakaszában;
  • traumás sérülések;
  • szívizominfarktus;
  • bármely vakcina bevezetése néhány nappal a vizsgálat előtt;
  • ételmérgezés.

Ezeket a feltételeket az immunrendszer megnövekedett munkája jellemzi, ami az antitestek fokozott termeléséhez vezet. A reakciót tévesen a treponema antitesteként ismerik fel, ezért pozitív eredmény merül fel.

Krónikus patológiás megbetegedések jelenlétében az immunrendszer számos nem-specifikus antitestet termel, amelyek reakcióba léphetnek. RW-ben ez az állapot hamis pozitív eredményt mutathat. Ezért érdemes figyelmeztetni az orvost a következő betegségekről:

  • a kötőszövet krónikus patológiája;
  • tuberkulózis;
  • a vírus etiológiájának krónikus betegségei: HIV, hepatitis B, C, D;
  • krónikus májbetegség;
  • autoimmun betegségek.

Korban a páciens testében a redox reakció lelassul. Az öregedő szövetek hamis pozitív eredményt is mutathatnak, ezért az idősebb betegek pontosabb kutatási módszereket kapnak.

Figyelj! Pozitív Wasserman-reakcióval további vizsgálatot végeznek, ami lehetővé teszi a pontosabb képet.

Ismételje meg újra

A szifiliszre vonatkozó ismételt vizsgálatot a szűrési vizsgálat megkérdőjelezhető eredményével végezzük. Egy vagy két keresztezéssel van ellátva - ez az elemzés további ellenőrzéseket igényel. A tanulmány számos esetben hamis pozitív eredményt adhat:

  • A betegség korai stádiuma. A tömör rekonstrukció előtt elegendő az immunglobulinok mennyisége a szervezetben.
  • A betegség késői stádiuma. A fertőzés óta több mint 2 év telt el, és az antitest titer fokozatosan csökkenni kezdett.

Az ismételt elemzés, amely 2-3 hét után történik, pontosan azt mutatja, hogy van-e betegség. Ha van pozitív eredmény a második alkalommal, további tisztítási technikákat alkalmaznak.

Terhességi tesztek

Az egyik leginkább váratlan pozitív eredmény lehet a szifilisz esetében terhes nőknél, különösen akkor, ha a nő nem változtatta meg a partnert. Ez a helyzet gyakran megrémíti a jövő anyákat, mivel a treponema negatívan befolyásolhatja a csecsemő intrauterin fejlődését.

A terhesség szűrése többször történik:

  • amikor regisztrált, 12 héten belül;
  • a 3. trimeszter kezdete, 30 héten belül;
  • születés előtt.

Ez az a minimális mennyiségű kutatás. A szifilisz hamis pozitív analízise a test szerkezetének a terhesség során bekövetkező átalakulása miatt nyilvánulhat meg. Amikor egy nő hordoz gyermeket, az immunrendszer számos antitestet termel - ez egy evolúciós eszköz, amely megvédi a babát az élet első évében.

A terhesség alatt további finomítási elemzést írnak elő, amelyet nagyobb pontosság jellemez. Ha az ellenőrző vizsgálat a szer jelenlétét mutatja a szervezetben, a kezelés kötelező. A terápia hatása a növekvő organizmusra lényegesen kisebb, mint a treponema esetleges káros hatása.

Hogyan készüljünk fel az elemzésre?

A rossz eredmény megakadályozásának egyik módja a tesztek előkészítése. A nem megfelelő előkészítésnek köszönhetően olyan reakciók fordulhatnak elő, amelyekhez nem specifikus antitestek keletkeznek, ami hibás eredmény megjelenéséhez vezet.

  • Az elemzést üres gyomorra kell vinni. Csak tiszta vizet használhat.
  • A vérminták előtti napon teljesen megszüntetni kell az alkoholt - ez további terhet ró a májra, ami pozitív eredmény megjelenéséhez vezethet.
  • A zsíros és sült ételeket, fűszeres ételeket és nagy mennyiségű fűszernövény evését elővigyázatosan ajánlott.
  • Legalább 60 perccel az elemzést megelőzően ajánlott tartózkodni a dohányzástól.
  • Mielőtt vért vesz a vénából, 10-15 percet kell pihennie a befogadó osztályon.
  • A nők nem ajánlottak vért adományozni a menstruáció során.
  • Lehetetlen röntgenvizsgálat, fizioterápiás eljárások elvégzése után elemzést végezni.
  • A fertőzéses megbetegedések súlyosbodása során tilos a szifiliszre vért adni.

Figyelj! Ha a beteg bármilyen gyógyszert szed, a vizsgálatot megelőzően konzultálnia kell az orvossal, néhány nap eltelt lehet a gyógyszer szedése és az elemzés között.

Mit tegyek, ha szifiliszom van?

Ne aggódjon, ha pozitív eredményekkel jár az elsődleges szűrés. A hamis szifilyt ismételten meg lehet határozni. Ha a diagnózist megerősítették, intézkedéseket kell hozni:

  • a szexuális partner vizsgálata dermatovenerológusban;
  • közeli hozzátartozók vizsgálata;
  • a megelőző kezelés végrehajtása, a rokonok fertőzésének megelőzése érdekében;
  • a betegszabadság nyilvántartásba vétele a kezelés időtartama alatt - a betegszabadság nem tartalmaz információt a diagnózisról, garantálja a titoktartást;
  • a kezelés folyamán egy speciális tanúsítványt adnak ki - meg kell adnod veled, hogy elkerüld a hamis pozitív eredményekkel kapcsolatos kérdéseket a következő néhány hónapban.

A szifilisz pozitív eredményei nem mindig megbízhatóak. Ezért ne aggódjon, és ajánlatos további kutatásokat várni. Az időben megkezdett helyes kezelés garantálja a gyors helyreállítást, minimális maradék hatásokkal.

PCR hibák lehetségesek? Hamis negatív és hamis pozitív PCR eredmények

Ossza meg az új információkat:

A fogadáshoz hamis eredmények a PCR diagnosztikában - Mind a hamis pozitív, mind a hamis negatív - hatással lehet a különböző körülményekre.

A polimeráz-láncreakció (PCR) alkalmazása mindenképpen szigorúbb betartást igényel az elemzés szakaszai, mintavételes elemzéstől kezdveorvos mielőtt értelmezné az elemzés eredményeit. Mennyire informatív a PCR-elemzés sok körülménytől függ.

  • Az elemzés hamis pozitív eredménye az anyag bejutásához vezethet (a húgyhólyag megkenése vagy kaparása) vér.
  • Hasonló álpozitív PCR eredmény nem kapunk anyag belépne a hámsejtek, valamint a nagy mennyiségű nyálka teljesen informatív.
  • A hamis DNS-elemzések eredményét a kapott minták helytelen szállítása és tárolása befolyásolja. A DNS-fertőzés ebben az esetben megsemmisíthető, következésképpen - hamis negatív eredmény.
  • A PCR-diagnosztika során a sterilitási rendellenességek egy másik oka a hamis pozitív PCR-nek. Az anyagot hozott vissza a beteg kaphat külföldi baktériumok a kezében egy orvos, ruhát, egy pohár vagy szennyezett eszközök, egyszer használatos eszközök. Ennek eredményeként "nem létező" fertőzést találtak.
  • Nem megfelelő reagensek. A bizonytalan diagnózis másik és komoly oka egy korlátlan és elavult laboratórium, ahol az orvosok "bezárják a szemüket" a reagensek alkalmatlanságára. Természetesen ez nagyon olcsó laboratóriumi diagnosztika, de nem befolyásolhatja eredményeit.

Ossza meg az új információkat barátaival és ismerőseivel:

Mi jobb és hatékonyabb a laboratóriumi diagnosztikában - PCR vagy ELISA analízis?

A PCR és az ELISA két olyan diagnosztikai módszer, amelyek az orvosi szakemberek körében elismertek. Mindkét molekuláris biokémiai vizsgálat pontos és megbízható. Van különbség a PCR vagy az ELISA között, mi a jobb és igazabb a patológiában? A kérdés megválaszolásához meg kell érteni a technikák lényegét, a hasonlóságokat és a diagnosztikai módszerek közötti különbségeket.

Mi a PCR?

A PCR egy nagyon érzékeny polimeráz láncreakció, amely kórokozót (vírusokat, baktériumokat, klamidit) észlel a szervezetben. A technika a fertőzésben jelen lévő specifikus DNS-struktúra meghatározásán alapul. A PCR-t akkor hajtják végre, ha a fertőző folyamat látens krónikus folyamatának gyanúja van egy olyan élőlényben, amely látens formában van. A PCR jellemzői és előnyei:

  • magas 100% -os érzékenység mindenfajta kórokozókra, a nukleinsav egyedi fragmenseinek jelenlétével;
  • az eredmény gyorsasága;
  • a kórokozó egyik típusának meghatározásának lehetősége;
  • több kórokozó egyidejű diagnózisa.

A laboratóriumi asszisztensek egy polimeráz láncreakcióval könnyedén meghatározzák az egyetlen kórokozó DNS-szerkezetét, ami lehetővé teszi a kezelés eredményeinek nyomon követését és értékelését a gyógyszer felírása után. A PCR mint új kutatási módszer elengedhetetlen az ilyen betegségek diagnosztizálásához:

  • tuberkulózis;
  • diftéria;
  • szalmonellózistól
  • HIV;
  • AIDS;
  • hepatitis C független stádium;
  • bacteriosis.

Mi az EIA?

Az ELISA immunológiai vizsgálati módszer és pontos elemzés a fertőző ágensek által okozott patológiák azonosítására. A vizsgálat akkor kerül kijelölésre, ha azt gyanítja:

  • szifilisz;
  • hepatitis B, C;
  • chlamydia;
  • toxoplazmózis;
  • citomegalovírus;
  • vírusos herpesz;
  • ureaplasmosis;
  • női mycoplasmosis.

Az Immunofer lehetővé teszi, hogy korai stádiumban azonosítsa az onkológiát. ELISA-t írnak fel arra, hogy felmérje a hormonok szintjét a vérben, diagnosztizálja az endokrin rendszer betegségeit a rákos markerek kimutatásával. Az immunológiai enzimes vizsgálat számos előnnyel jár:

  • A végrehajtás egyszerűsége és gyorsasága;
  • nagy érzékenység az antigén-antitestek reakcióihoz, még a szervezet kórokozója jelentéktelen koncentrációjának hátterében;
  • Magas szintű elemzése specifitást, amely lehetővé teszi, hogy gyorsan észleli és telepíti az antigén-antitest komplex, az enzim alkalmazott címke képes pontos megoldásához jel közötti kölcsönhatás a két, hogy ismerje immunglobulinok (antitestek IgM, IgG) a vérben.

Abban az esetben, a fertőzés egy organizmus a kezdeti szakaszban domináló immunglobulin osztály M. szerint a progresszió fertőzés csatlakozott antitestek osztály A. Ha a betegség előrehaladott stádiumban kapcsolók, elkezd generációs osztályú immunglobulin immunglobulin G. Az enzimreakciót felfedi a mértékét a betegség súlyosságától és a betegség stádiumától fejlődés.

Az IFA eltér a PTSR-től?

A PCR és az immunofermentális (ELISA) vizsgálatok egyaránt igénylik a diagnosztikai célokat. Mindkét tanulmánynak vannak előnyei és hátrányai, hasonlóságai és különbségei.

  1. ELISA. A fő irány a markerfehérjék létfontosságú aktivitásának, vagy a kórokozó és az immunrendszer közötti kapcsolatok kialakulása. A szervekben a fertőzés tényének elutasítása vagy megerősítése. Az ELISA és a PCR közötti különbség bármely bioméret alkalmassága az elemzéshez: szövetminta, nyál, vizelet, vér.
  2. A PCR lehetővé teszi egy adott gomba, vírus és baktérium csoportba tartozó kórokozó azonosítását. Polimerazny módszer a diagnózis felismeri a patogén szervezet az anyagban: folyadék, szövet, szerv. A szervezeten belüli kóros folyamatok nagy léptékű ábrázolásához az orvosok azonnal kétfajta elemzést rendelnek a komplexumhoz. Ez fontos a ZPPPA azonosításához (a nemi közösülés során továbbított patológiák).

Egy fertőző betegség, szexuális úton terjedő fertőzés és az antitestek szintjének pontos meghatározása a PCR-ben először, mivel az ELISA vizsgálat eredményei ésszerűtlennek tűnnek az alapadatok megszerzése nélkül.

Antitestek kimutatása a szervezetben, egy IFA-t nem lehet egyértelműen kimutatni: vajon a patológiás folyamat a szervezetben zajlik-e vagy sem. Valószínűleg a kórokozóval való kapcsolatok voltak, de messze a múltban, és az elemzés hamis eredményt adhat.

Nem lehet egyértelmű következtetéseket levonni a PCR-ről vagy az ELISA-ról, és ami valójában megbízhatóbb. Az ELISA hatékony diagnosztikai módszer, de a betegség kialakulásának valószínűsége csak PCR-rel igazolható, ezért mindkét tanulmány együttes elvégzése ésszerű. A PCR pontosabb vizsgálati módszer, de szövetanyagból és a test egy külön részében. A hiba technika pontossága ellenére gyakran előfordul, mert a fertőző folyamat gyorsan terjedhet a test egészében.

A különbség a kutatás között

Kövesse az előrehaladást, például: a chlamydia a nyaki csatornán keresztül, nehéz. A petefészkekben és a petevezetékben a fertőzés hiányozhat, ha az ELISA teszt pozitív választ ad, és a PCR-vizsgálat negatív. Véletlenül fordul elő. Az eredmény 100% -ának elérése érdekében mindkét PCR-tesztet és ELISA-t jobban végezzük együtt.

Előfordul, hogy a PCR- vagy ELISA-analízis eredményei nem egyeznek meg, ami akkor történik, ha a krónikus fertőzés meghosszabbodik, vagy ha a szervezet hozzászokik a hatásához. Ebben az esetben az ELISA negatív, és a PCR pozitív. Ha van néhány mikroba a kenetben, de antitestek jönnek létre, és a titerek hosszú ideig a vérben is maradnak, még a kezelés után is, az ELISA pozitív lesz, és a PCR negatív.

Gyakran, a módszerek hamis pozitív megbízhatatlan válaszokat adnak, például: ELISA pozitív, PCR pozitív. Figyelembe veszik a páciens tüneteit, függetlenül attól, hogy fertőzöttek voltak-e. Valójában előfordul, hogy a PTSR negatív és az IFA negatív.

A különböző klinikai esetek egyéni megközelítést igényelnek. Ezért az elemzés jobb az elvégzéshez, pontosabban: PTSR vagy IFA - a döntést a kezelőorvos végzi.

Ellenőrizze a rejtett szexuális fertőzések és a tesztek lehetőleg partnerrel. Végtére is előfordul, hogy egyértelműen kifejezték a gyulladásos folyamatot, míg a másiknak nincs gyanúja sem, hogy negatív hatással van a szexuális életre és bizalmatlanságot okoz. Mindig jobb, ha orvoshoz kell fordulni, és mindkét partnernek kezelnie kell, hogy növelje a kezelést és csökkentsék a terápia időtartamát.

Például: az ureaplazmózissal és a mycoplasmosissal a gyulladásos folyamatok kíméletes kezeléséből származó jó eredmények csak közös kezelés esetén érhetők el.

A sajátosságok figyelembevételével megállapítható, hogy a PCR-diagnosztika és az ELISA eltérést mutat, de mindkét módszer megbízhatóan meghatározza a patológiák jelenlétét. Azonban csak a szakemberek képesek azonosítani a különbségeket a módszerek között, választani a valódi és helyes diagnosztikai módszereket, pontosabban átírni az elemzés eredményeit.

A videóról többet megtudhat a PCR módszerről:

Tipikus hibák a polimeráz láncreakció diagnózisában

A polimeráz láncreakció (PCR) alapján végzett laboratóriumi diagnosztikája a gyorsaság és a nagyfokú érzékenység miatt egyre nagyobb fejlődésen megy keresztül. Azonban a módszer egyszerűsége és kényelme ellenére számos olyan feltétel létezik, amelyek meghibásodása megbízhatatlan vagy hamis eredményhez vezethet.

Az első pillantásra egyszerű, a módszer számos "buktatót" tartalmaz, amelyeknek szinte minden laboratóriumi szakemberrel foglalkoznia kell. Különböző hibák eredményezhetik mind a tapasztalat hiányát a technika alkalmazásában, mind pedig a biokémiai vagy bakteriológiai laboratóriumokban korábban dolgozó személyzet gondolkodásának sztereotípiáinál, ahol a munka egyéb követelményei is vannak. Ilyen hibák eredményeképpen a tesztek hamis-pozitív, hamis-negatív vagy megbízhatatlan eredményei érhetők el.

A laboratóriumi gyakorlatban megengedett minden hiba három osztályba sorolható:

  • előtanulmányi szakaszbeli hibák;
  • az analitikai szakasz hibái;
  • hibák postanaliticheskogo színpadon.

A PCR-diagnosztika előtanulmányi fázisának hibái

Biológiai anyag felvétele.

Chlamydia trachomatis képes megfertőzni a nyálkahártyán az urogenitális traktus, kötőhártya epitélium a szem és ízületi üregben. Ezért, abban az esetben a feltételezett urogenitális chlamydiosis anyag a tanulmány kell szolgálnia a kaparás az urogenitális traktus, szembetegség az újszülött - kaparás a kötőhártya, a chlamydia arthritis - punctata szinoviális folyadék.

A mycobactrium tuberculosis az emberi test szinte minden szervét és szövetét érintheti, vagyis a kutatási anyagot nem szabad a kóros folyamat különböző formáiban égetni.

Így ha a gyermeknek a szem csontvelője van, és az urogenitális traktusból vett mintát veszik a vizsgálatnak, és a váladékot a tuberkulózis céljából veszik a vizsgálat során, akkor a negatív eredmény nem zárja ki a beteg fertőzésének tényét.

A második hiba a preanalitikai szakaszban az anyag rossz felvétele a vizsgálatnak.

A biológiai anyagokra vonatkozó általános követelmények a mikroorganizmusok maximális koncentrációja a mintában, valamint a PCR-t gátló nemkívánatos szennyezők hiánya.

Például a Chlamydia trachomatis intracelluláris parazitákra van szükség, ezért a vizsgált anyagnak nagyszámú hámsejtet kell tartalmaznia [4]. Azaz, a capture az anyag kimutatására ezek a mikroorganizmusok, hogy nem a kaparás, de a stroke, mint egy kenetet Chlamydia trachomatis, nem fogja felismerni, még ha azok a szervezetben nagy számban.

Amikor az anyagot az urogenitális traktusból veszik, elkerülendő a gátló szennyeződések, például a nyálkahártya, a vér vagy a genny. Ehhez a kaparást legkésőbb két órával a vizelés után kell venni, a nők figyelembe veszik a ciklus napjait [1]. A felesleges nyálkahártyát vagy gennyet egy steril pamut törlővel kell eltávolítani, mielőtt a bioanyagot bevenné. Az anyagot előnyösen speciális műanyag szondákkal kell bevinni, ami csökkenti a vérben való megjelenés valószínűségét a mintában, ráadásul a gyapotszövettől eltérően a szállítóanyagot és a vizsgálati anyagot nem szitálja. [1]

Biológiai anyag kezelése

Megfelelő urogenitális figyelembe scrapings - egy eljárás fájdalmas a hímek és gyermekek, így a tanulmány használhatja az első része a reggeli vizelet tartalmazza a maximális számú epithelialis [1] a következő, mert eléréséhez szükséges sejtüledéket a vizelet. Azonban csapadékot tartalmaz nagy mennyiségű sót és a karbamid, amely, amikor a fluoreszcens detektálás technológiák denaturált próbákat, ami oda vezethet, hogy a hamis pozitív eredményeket. Tehát a sejtüledéket vizelet kell kötelezően mossuk sóoldattal [4]

A következő hiba preanalitikai fázis - helytelen kezelése vért vesznek. A véralvadás megakadályozására a szállítási folyamat kell használni antikoaguláns. Sok laboratóriumban alkalmazható véralvadásgátló heparin. Azonban, a heparin kellően erősen gátolja a PCR, és tekintet nélkül a vizsgálati rendszerben és a minta előkészítésére, mind az eredményeket a minta azt tartalmazó, érvénytelen, ha bármely, a belső kontroll PCR vagy negatív, függetlenül a valós helyzetet, ha a belső kontroll nincs [3]

Biológiai anyag tárolása

A PCR-diagnosztika analitikai fázisának hibái

Működési hibák

Az analitikai fázis hibái általában a PCR analízis elvégzéséhez a készlethez mellékelt utasítások figyelmen kívül hagyásával járnak.

Az egyik ilyen hiba a mintaelőkészítési rendszer rossz választéka. Kevesebb veszélyes használatát gyors módszer komplex biológiai anyagok - mint például a vérplazma, mert ebben az esetben valószínűleg így helytelen mérési eredmények miatt A mintában maradó PCR inhibitorok, ami viszont arra fogja kényszeríteni a szakmai centrálzár megismételni a kísérletet, és megtudja az oka hibák. Sokkal veszélyesebb, ha, a helytelenül választott vizsgálati rendszer a folyamat a minta-előkészítés elvész részét vagy egészét a DNS-t vagy RNS-t a kórokozót - ebben az esetben, fennáll a veszélye a téves negatív eredményt.

A második hiba helytelenül előkészített háttér-tesztcsövek tesztrendszerekhez, fluoreszcens érzékeléssel a végponton. Ez leggyakrabban annak a ténynek tudható be, hogy a laboratóriumi munkavállaló elfelejti megváltoztatni őket, amikor új reagenskészlet jelenik meg, vagy gazdaságilag nem. Lehetséges, hogy a reakcióelegy ugyanazon komponensei alig eltérő szintű fluoreszcenciával rendelkeznek, azonban különböző reagenssorozatokban az összetevők koncentrációja eltérhet, és a különböző fluoreszcens szintek valószínűsége magas. Így egy hiba, amely bizonyos esetekben figyelmen kívül hagyható, másokban nagyszámú megbízhatatlan eredményt adhat.

A háttércsövek helytelen előkészítésével kapcsolatos további hiba a polimeráz hozzáadása. Ez történhet véletlenül, vagy mert a labortechnikus nem tudja teljesen megérteni, hogy miért nincs szükség polimeráz hozzáadására. Lehet két forgatókönyv: ha a vizsgálati rendszer nem tartalmazza a belső kontroll vagy egy negatív kontroll mintát át nem esett használt puffer kiosztás, és ha a vizsgálati rendszer magában foglal egy belső kontroll, amely alatt a paraffin és / vagy negatív minta átment lépést elosztása. Az első esetben a polimeráz hozzáadása nem befolyásolhatja szignifikánsan az eredményt, de ebben az esetben fennáll a pozitív és a belső szennyeződés veszélye. A második esetben minden negatív érték megbízhatatlan. Nem probléma a hiba felismerése, mivel a normalizációs értékek nagyon magasak, megközelítőleg 103, és a fluoreszcenciaértékek egyes tesztcsövekben sokkal kisebbek, mint 1.

szennyeződés

A szennyeződés problémája akkor merül fel, ha a laboratórium nem megfelelően szervezett, vagy amikor a pozitív minták pontatlanok. Tehát amikor a gélelektroforézist kimutatási módszerként alkalmazzuk, a magatartási helyiségnek szükségképpen külön bemeneti és szellőztető rendszerrel kell rendelkeznie. Ellenkező esetben nagyon nagy az a valószínűsége, hogy a nyitócsövekből származó ampulla a másik helyiségbe kerül. Ez azzal a ténnyel járhat, hogy az idő múlásával a gyakori fertőzésekre egyre több mintát vizsgálnak pozitívak. Az ilyen szennyezés első szakaszaiban a negatív kontroll tiszta maradhat, mivel a hamis pozitív eredmények megjelenése statisztikai jellegű.

A fluoreszcens detektálás esetében a csövek nem nyithatók meg, és elméletileg a szennyeződés valószínűsége nulla, de a nyílás lehetősége nem kizárt. Ezért jobb, ha az erősítést és a detektálást külön helyiségben végzik, akkor vészhelyzet esetén egy helyiséget szennyeznek.

Egy másik hiba, amely a minták szennyeződéséhez vezet, mind a klinikai minták, mind a pozitív kontrollminták és szabványok pontatlan kezelésével jár. Egyes laboratóriumi szakemberek egy tippet használnak, hogy nagyszámú csövet takarítsanak meg ugyanazon anyagból. Ez normális, ha a csövek üresek vagy tartalmuk megegyezik (erősítőcsövek előkészítése). Azonban, ha a cső a mintában, így például, a minta előkészítése során, még akkor is, ha így ugyanazt a megoldást a kémcsőben növeli a különböző DNS-transzfer a csövek között - az úgynevezett kereszt-szennyeződését. A keresztszennyeződés elkerülése érdekében tanácsos a szűrőkkel tippeket használni a potenciálisan DNS-tartalmú minták beillesztéséhez.

Ezenkívül hanyag munkával fennáll a kockázata annak, hogy a mintabe beiktatják az inhibitorokat (például a kesztyűből származó talkumot).

Hibák az eredmény értelmezésében

Az eredmények értelmezésénél hibásan beszélve érdemes figyelembe venni az észlelés különböző módszereit.

Amikor detektálását gélelektroforézis, fennáll annak a kockázata, hogy a nem-specifikus fragmentumok specifikus, ha azok hasonló hosszúságú és nincs lehetősége világosan és egyértelműen összehasonlítani kontroem pozitív, és ideális esetben a hossza a marker. Továbbá, mivel a mintákat gyakran alkalmazzák a gélre egyetlen csúcs esetén, már a kimutatási szakaszban is fennáll a szennyeződés kockázata, ha a csúcs gyengén mosódik, vagy az egyik minta igen nagy koncentrációjú DNS-t tartalmaz. Ez a fajta szennyeződés könnyen megfigyelhető, ha a sávot tudatosan negatív mintában figyeljük meg, de ez nem különbözik a laboratóriumi szennyeződésektől, és megköveteli az összes minta ismételt ellenőrzését.

Az egyik értelmezése a kapcsolatos hibák a használata a módszer fluoreszcens kimutatására a végpont a figyelmetlenség, hogy a normalizáció értékeinek háttér kémcsövek és fluoreszcencia értékeket negatív minták között. Ily módon, amikor megfelelően vannak tárolva a háttérben próbák csövek is összeomlik, és a normalizációs értékének jelentősen megnövekedett időtartamra néhány óra és néhány nap, a fluoreszcencia értékek a minták egy kisebb vagy nagyobb mértékben alábecsülni. A kapott eredmények megbízhatóságának fő kritériumai negatív minták lehetnek. A háttér és az erősítő csövek közötti eltérések hiányában a negatív minták fluoreszcenciaértékek közel vannak az egységhez, vagy ritkán kissé magasabbak. Ha egy vagy több mintában vagy negatív kontrollban levő fluoreszcenciaértékek lényegesen alacsonyabbak, akkor nagyon valószínű, hogy a háttércsövek nem felelnek meg ennek a vizsgálatnak, amely esetben módosítani kell őket.

Amellett, hogy a fenti példa, előfordulhat, hogy a háttér-fluoreszcenciát növekszik amplifikációs csöveknél, miközben a kémcsöveket a háttér fluoreszcencia változatlan marad. Ez a helyzet állhat elő, amikor az amplifikációs csöveket szobahőmérsékleten tároljuk. Ebben az esetben a tartalom növeli a pozitív eredmények alacsony fluoreszcencia értékeket. Eredmények így tanítani, mint amikor szennyeződés a laboratóriumban, de ebben az esetben az összes alacsony fluoreszcencia értékek megközelítőleg azonos, ebben az esetben szennyeződés elég ritka, mivel nem valószínű, hogy azonos mennyiségű idegen anyag lesz minden negatív csöveket. Ilyen könnyen elkerülhető, ha megváltoztatja a háttér csövek havonta egyszer és fél, ebben az esetben, mint általában, nem volt ideje, hogy meg elég nagy a különbség a kész háttér és az erősítés csöveket.

A PCR-diagnosztika utólagos elemzési fázisának hibái

Hibák a végső, postanalytical szakaszban kapcsolatos téves értelmezésére az orvos PCR-eredmények elemzését miatt tévhiteket a fertőző ágens vagy módszer lehetőségeit.

Például a klamidia elleni kontrollvizsgálat az antibiotikum végét követő 1 héttel pozitív eredményt ad. Az orvos arra a következtetésre jut, hogy a terápia hatástalan. Azonban a végső kimeneti lehet legkorábban 4-6 héttel az epiteliális réteg helyett, amely parazitájaként a mikroorganizmus [1] Egy korai diagnózis mutathat helytelen eredmény, mivel a hámsejtek is fennállnak halott mikroorganizmusok.

Abban az esetben fordított kutatás lehetséges „immunológiai lábnyom” - a maradék antitestek szintje, ami egyes embereknél is fennállhat több hónapig vagy akár évekig is visszanyerés után vagy PCR nem tekinthető fajspecifikus vizsgálati rendszereket.

Mi a PCR? Hamis pozitív PCR eredmény

A polimeráz láncreakcióra alapozott diagnózis 30 évvel ezelőtt jelent meg az amerikai tudós Carrie Mulles kutatásának köszönhetően. A módszer széles körben elterjedt, és áttöréssé vált a mikrobiológiai kutatásokban.

Általában a Mulles által javasolt technika lehetővé teszi a gének klónozását. A kutatás eredményeként azonosított mikrobiológiai diagnosztikai eszköz lényege a következő. A hatalmas mennyiségű géninformáció közül lehetõvé vált, hogy megtaláljuk a kívánt DNS-kóddal rendelkezõ mikro-helyet. Ezt a fragmentumot, a DNS természetes reprodukciós képességének (szaporodás) felhasználásával, többször klónozzuk.

Az egész folyamat egy kémcsőben történik. A minta sokszorosítása polimeráz enzim alkalmazásával történik. Két, a DNS egy adott részéhez vett mintát fúrták a megoldást kiegészítő területek keresésére, és csatlakoztak hozzájuk. Egy kezdő terület keletkezik, amelyet átmásolunk. Ez az, ami a PCR.

A DNS természetes reprodukciója állandóan jelen van minden élő szervezetben. A fentiekben leírt viszonylag fiatal diagnosztikai módszer lehetővé teszi ezt a folyamatot. És a hatás nem az egész molekulán, hanem csak a nukleinsav egy bizonyos részén (DNS) van. A reakció megismétlődik, a fragmentált DNS szakaszokat geometriai progresszióval növelve, ezért a reakciót láncreakciónak nevezzük.

A láncreakció folyamatának megkezdéséhez egy idegen elemnek jelen kell lennie a vizsgált bioszférában, különben nem lesz reakció.

Alkalmazási területek

A PRC-n alapuló diagnosztikai vizsgálatokat sikeresen alkalmazzák elsősorban az orvostudományban. Ez a módszer lehetővé teszi a vírus által fertőzött sejtek és genetikai betegségek azonosítását. A pulmonológusoknak lehetőségük van a tüdőgyulladás és a tuberkulózis vírusának azonosítására. A nőgyógyászati ​​és urológiai gyakorlatban olyan betegségeket azonosítani lehet, amelyekkel a betegek már évek óta észrevétlenek lehettek, mint pl. Az ureaplasmosis és a klamidia. Jelenleg a polimeráz láncreakciós módszer a fertőző betegségek diagnosztizálására szinte az összes orvosi területen.

Elengedhetetlen hasonló kutatási és igazságügyi kutatók számára. A biológiai anyagból származó, a bűncselekményen maradt DNS-elemzés szerint a szakértők meghatározhatják egyes személyek részvételét. Az olyan esetek, amikor az elkövető nem hagy nyomot, az ujjlenyomatok törlése után már régóta történelem.

Annak ellenére, hogy nem találkozott a PCR fogalmával, amit nem tud, sokan megtapasztalhatják a diagnózis módszerének előnyeit. Az ilyen vizsgálatok képesek azonosítani az egysejtes kórokozókat, amelyek túlmutatnak más immunológiai és bakteriális diagnózismechanizmusokon. A reakció csak néhány órát tart, ez lehetővé teszi, hogy eredményt adjon a munkanap alatt.

Hibák a kutatási eredményekben

A laboratórium napi munkája során nagyszámú DNS anyagot kapunk a tesztcsövekben. A bioméret-kutatások megsértése hamis-pozitív vagy hamis-negatív diagnosztikai eredményhez vezethet. A szabályok megsértése legalább egy láncreakció egyik szakaszában hamis eredményhez vezethet.

Az orvosnak a bioméreteket figyelembe véve óvatosnak kell lennie a feladataik ellátásában. Kenetekben vagy kaparókban nem lehet idegen elemek, például vérsejtek. Ugyanakkor egy teljes vizsgálat elvégzéséhez elegendő mennyiségű hámsejtet kell az anyagban rendelkezésre bocsátani, és az öntudatlanul összegyűjtött anyag nagy mennyiségű nem informatív nyálkahártyát tartalmaz.

A PCG hamis pozitív eredményét nagymértékben befolyásolja a fertőzött DNS-sejtek szállításának és tárolásának módja. A vizsgálat valamennyi szakaszának technikai követelményeinek megsértése miatt a fertőzött anyag megsemmisülhet, vagy megváltoztathatja annak szerkezetét, ami a reakció végrehajtásának lehetetlenségéhez vezet.

Mint minden más laboratóriumi vizsgálathoz, a polimeráz láncreakció minden eszközhöz megfelelő kezelést igényel. A laboratóriumnak és a személyzetnek meg kell vizsgálnia a sterilitást a diagnosztikai tesztek minden szakaszában. Az egészségügyi normák figyelmen kívül hagyása külső fertőzés kimutatásához és a vizsgálat hamis pozitív eredményéhez vezethet.

A használt reagensek nagy jelentőséggel bírnak az elvégzett munka minősége szempontjából. Polimeráz láncreakcióval végzett diagnózis esetén a DNS-t nukleotidok oldatába helyezzük. Minden anyagnak használhatónak kell lennie. A folyamat csökkentése a hatékonysági szint csökkenéséhez vezet.

A PCR-re épülő diagnosztikai módszer 100% -os eredményt ad. De mivel a felhasznált anyagok nagyon érzékenyek a különböző tényezőkre, csak egy képzett laboratórium adhat teljesen helyes eredményt.

PCR elemzések eredményei

PCR-a kutatások már régóta szerepelnek a különböző betegségek laboratóriumi diagnosztikai vizsgálatainak körében.

A fejlesztés és fejlesztés több évtizeden keresztül a technika nélkülözhetetlen a dermatovenereológiai szolgáltatáshoz.

Ebben a cikkben megtudhatja

Melyek a PCR vizsgálatok és azok eredménye?

Polimeráz láncreakció - Ez egy diagnosztikai módszer, amely lehetővé teszi a betegség kórokozójának azonosítását.

A genetikai anyag egyedülálló szekvenciája, amely csak egy faj mikrobiális sejtében vagy patogén mikroorganizmusok törzsében jelen van, a szükséges faktor.

Leggyakrabban a vizsgálat célja egy baktérium vagy vírus DNS, de a PCR módszer a mikroorganizmusok RNS-ét eredményezi.

Miért használnak különböző biológiai anyagokat:

  • nyál
  • szöveti biopszia
  • vizelet
  • cerebrospinális folyadék
  • a vér
  • kapszulák a nyálkahártyákból

A PCR-diagnosztika eredményei:

a betegség jelenlétére vagy hiányára vonatkozó adatok a legegyszerűbb, hozzáférhető információk.

Vannak olyan PCR-módszerek, amelyek eredményeként a fertőzés tényének megállapításán túl a fertőzés aktivitását, a betegség dinamikáját és a folyamatos kezelésre adott válaszokat is fel lehet mérni.

Ezt az opciót a "polimeráz láncreakció valós időben" nevezik, amely a leggyakrabban használt krónikus vírusfertőzésben szenvedő betegeknél - hepatitis, HIV.

A technika fő előnye - a legmagasabb érzékenység és specifitás.

Az ilyen elemzések gyorsan elvégezhetők és nagyon pontosak.

Megbízható adatokkal a lehető legkorábban elkezdheti a kezelést.

A PCR vizsgálat három szakaszból áll:

  • A minta előkészítése az anyag bevitele után.
  • Maga a polimeráz reakció, amely az anyag fragmentumainak ismételt másolásából áll.
  • Az eredmények értelmezése.

A PCR-vizsgálatok eredményei pozitívak, ha a feltételezett kórokozót kimutatják.

Ha nem, az eredmény negatív.

Mint ilyen, a vizsgálati eredmény formanyomtatvány nem rendelkezik jóváhagyott formával.

Ez annak köszönhető, hogy az adatok kutatását és rögzítését számítógép végzi.

Ennek megfelelően az ábrán szereplő grafikonok és adatok a szoftver által előírt módon vannak feltüntetve, amely alatt a készülék működik.

Ezért a vizsgálatok eredményeinek értelmezése speciális orvosi képzést és tapasztalatot igényel.

Abban az esetben, ha a polimeráz láncreakciót valós időben hajtják végre, a kívánt mikroorganizmus genetikai anyagának detektált példányainak számát külön jelöljük a vizsgálati eredményekben.

Természetesen, ha ezeket elvileg feltárják.

Pozitív eredmény

Minden szerek a szexuális úton terjedő betegségek és vérrel fertőzések (hepatitis, HIV), ha az emberi szervezetben elkezdenek szaporodni, de nem mutatkozik.

Van egy úgynevezett inkubációs időszak vagy torpid, látens fertőzés.

Ilyen esetekben a PCR még mindig megtalálja a kórokozók genetikai markereit a diagnosztikai anyagban a fertőzés pillanatától számított néhány napon belül.

Annak érdekében, hogy az elemzés pozitívvá váljék, egy kórokozó mikroorganizmus egy DNS- vagy RNS-molekula elegendő az összegyűjtött diagnosztikai anyagban.

Számos korai eszköz esetében 40 mikrobiális test technikai érzékenységi küszöbérték van.

De mint általában, ha valaki fertőzött egyik vagy másik szexuális úton terjedő betegség, vagy az STD, akkor patogének mintákban nagyobb ez a szám, és az elemzés pozitív lesz.

Negatív eredmény

Ez a lehetőség nagyjából két esetben lehetséges: egy személy nem fertőzött, vagy a diagnosztikai anyag nem megfelelően összegyűjtött.

Természetesen nem zárható ki, hogy a kórokozók koncentrációja a vizsgálati mintában kisebb lehet, mint az eszköz érzékenységi küszöbe.

De ez a helyzet rendkívül ritka, és ha az orvosnak kétségei vannak, akkor az elemzést egy idő után is meg lehet ismételni.

Ha a PCR-diagnózis eredménye negatív marad, akkor a személy egészséges.

Máskülönben, ha második tesztet kap pozitív, akkor azt jelenti, hogy a beteg fertőzött, és meg kell kezdeni a kezelést.

A PCR analízis eredményeit meg kell kódolnia a kezelőorvosnál

A PCR elemzés eredményeit megfejtse a kezelőorvos, aki ismeri a kezelés folyamatát.

Ideális esetben ugyanaz a szakember kell, aki összegyűjti a diagnosztikai anyagot a vizsgálat során, megfigyelheti a pácienst, és nyomon követheti az emberi egészség minden változását.

Sajnos a modern vénás betegségek és fertőzések klinikai lefolyása nagyon eltér a klasszikusoktól.

Ilyen esetekben a PCR-elemzések eredményeit más tanulmányokból származó adatoknak is támogatniuk kell:

  • a genitális szekréció kenetének mikroszkópos vizsgálata a húgycsőből
  • a vírus szerológiai reakciói bizonyos kórokozók ellen (ELISA, RPGA és mások)
  • kulturális kultúra

Olyan helyzetek, amikor a különböző módszerek adatai ellentmondanak egymásnak, szerencsére nem sokszor találkoznak. Például - a PCR pozitív, és az ELISA pozitív.

Ez történik a páciens kezelésének végén, amikor a kórokozó mikroorganizmusok már elpusztultak és nincs ilyen kórokozó az emberi szervezetben.

De az antitestek (immunglobulinok) a fertőzés kórokozóinak antigénjeihez még mindig hetekig vagy akár hónapokig terjednek a vérben.

A klinikai helyreállítással ez az ellentmondás a PCR javára értelmezhető, mivel eredményei pontosabbak, mint az antitesteken alapuló vizsgálatok.

A termesztés a legérzékenyebbnek tekinthető, de néhány napot vagy akár hetet is igénybe vehet az eredmények elérése érdekében.

Ezért bakteriológiai kutatásokat csak akkor hajtanak végre, ha a PCR nem tud garantálni a pontos és pontos választ.

Fontos, hogy összehasonlíthassuk az elemzések eredményeit és a fertőzés folyamatának klinikai jellemzőit.

Tehát bizonyos esetekben a PCR eredménye pozitív, bár a kórokozót sikeresen megszüntette az immunrendszer.

Mivel a páciens éppen befejezte a kezelést a testében, halott patogén mikroorganizmusok továbbra is fennmaradnak.

A genomjuk megtalálható, de még mindig pozitív eredmény nem jelenti a betegség jelenlétét.

A PCR elemzés hamis negatív eredményei lehetségesek:

  • a páciens rossz megközelítésében
  • anyagot nem a kívánt biológiai környezetből

Nagyon fontos a betegség minden részletének és árnyalatának alapos megismerése.

Különös figyelmet kell fordítani arra, hogy az érintett személy hogyan és milyen módon alkalmazta az első tünetek megjelenésétől a megfelelő orvosi ellátást.

Például - antibiotikumok, amelyek bármelyik gyógyszertárban megvásárolhatók.

Az önkiszolgálás gyakran a mikrobák számának jelentős csökkenéséhez vezet, melynek következtében a PCR elemzés hamis negatív eredményei előfordulhatnak.

Ez azt jelenti, hogy egy személy, orvos szerepe csak a diagnosztikai anyag megfelelő összegyűjtéséhez és az eredmény megfejtéséhez vezet.

A módszer diagnosztikai képességei

Ez a laboratóriumi kutatás nagyon univerzális.

PCR-diagnosztika van:

  • szexuális úton terjedő fertőzések.
  • A légzőszervi megbetegedések kórokozói (pertussis, hörgősejtes gyulladás)
  • különösen veszélyes fertőzések (HIV), hepatitis
  • bélbetegségek okozta kórokozók (rotavírus, szalmonella, Helicobacter pylori)
  • influenzavírusok és mások.